Identificación del subtipo de receptor P2Y involucrado en la inhibición presináptica inducida por ATP

JUAN GUARRACINO; ALEJANDRA G. PALMA; ALEJANDRO CINALLI; VERÓNICA FERNANDEZ; LILIANA ROQUEL; ADRIANA LOSAVIO

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión SAIC; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Identificación del subtipo de receptor P2Y involucrado en la inhibición presináptica  inducida por ATP   Juan Guarracino, Alejandra Palma, Alejandro Cinalli, Verónica Fernández Menna, Liliana Roquel, Adriana Losavio   ATP/ADP, inhibición presináptica, receptores P2Y13, sinapsis neuromuscular   De los 8 tipos diferentes de receptores (R) P2Y identificados, los P2Y1,2,4,6,11 estarían acoplados a proteína Gq/11 y los P2Y12,13,14 a proteína Gi/o. Previamente hemos demostrado que, en sinapsis neuromuscular de mamífero, el ATP induce inhibición presináptica de la liberación espontánea de ACh al activar RP2Y (Neuroscience 2006, 2008), siendo este efecto abolido por la toxina pertussis y N-etilmaleimida, lo cual indica que los RP2Y involucrados son los acoplados a proteína Gi/o. Como los RP2Y12 ó 13 son activados por nucleótidos de adenina y los RP2Y14 por UDP-glucosa sugerimos que el efecto inhibitorio es llevado a cabo por los primeros. Nuestro objetivo fue identificar el/los subtipo/s de RP2Y responsables de la modulación presináptica inducida por el agonista preferencial de los RP2Y12/13, 2-MeSADP (150 nM). En preparaciones frénico-diafragma de ratones CF1 encontramos que 2-MeSADP redujo la frecuencia de los potenciales de placa miniatura al 56.9 ± 2.8% (n=7, p<0.05) de los valores controles siendo más potente en su acción que ADP y ATP (EC50: 2-MeSADP 0.08 µM, ADP 4.18 µM, ATP 5.07 µM). Este efecto fue revertido en presencia de los antagonistas selectivos para los RP2Y12/13 2-MeSAMP y AR-C69931MX (2-MeSAMP 91.2 ± 2.6%, 2-MeSAMP + 2-MeSADP 90.8 ± 1.5%, n=4; AR-C69931MX 93.7± 2.1%, AR-C69931MX + 2-MeSADP 94.6 ± 2.0%, n=4). Recientemente se comercializaron antagonistas específicos para cada uno de los R; el efecto de 2-MeSADP fue prevenido por el antagonista del RP2Y13 MRS2211, pero no por el del RP2Y12 MRS2395 (MRS2211 106.4 ± 4.0%, MRS2211 + 2-MeSADP 107.6 ± 8.4%, n=6; MRS2395 101.6 ± 5.9%, MRS2395 + 2-MeSADP 66.9 ± 1.7%, n=10, p<0.05). Como 2-MeSADP también es agonista del RP2Y1 estudiamos su efecto en presencia del antagonista (MRS2179 106.7 ± 5.5%, MRS2179 + 2-MeSADP 62.4 ± 3.6%, n=4, p<0.05). Estos resultados sugieren que el efecto modulador del ATP/ADP sobre la secreción del neurotransmisor en sinapsis motoras está mediado por el subtipo del receptor de ATP P2Y13.