Trypanosoma cruzi: mecanismos moleculares de obtención de nutrientes del hospedador

MARTINEZ SAYE M; MIRANDA MR; PEREIRA CA

Jornada; IX Jornadas Científicas Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; 2010

Introducción: Trypanosoma cruzi, el agente causante de la enfermedad de Chagas, afecta a millones de personas en Latinoamérica y constituye un serio problema sanitario en nuestro país. Este parásito presenta numerosas características metabólicas que lo diferencian de sus hospedadores mamíferos. Muchas de estas diferencias fueron consecuencia de millones de años de adaptación al parasitismo a través de los cuales algunas rutas metabólicas de síntesis de precursores fueron reemplazadas por sistemas de transporte. Es decir, en lugar de sintetizar un metabolito, obtenerlo del hospedador resulta favorecido desde el punto de vista energético. Por esta razón, la identificación y estudio de moléculas transportadoras de compuestos vitales para el parásito, constituye un punto clave en el desarrollo de nuevos agentes terapéuticos contra el Mal de Chagas. Objetivos: En nuestro laboratorio hemos caracterizado funcionalmente dos transportadores de aminoácidos básicos y uno de poliaminas pertenecientes a la familia multigénica que denominamos TcAAAP. Teniendo en cuenta la experiencia obtenida y las características particulares que presentaron estas moléculas, el objetivo de este trabajo es identificar nuevos miembros de esta familia, expresarlos en un sistema heterólogo y posteriormente validarlos en el parásito. Metodología: La identificación de nuevos transportadores se realizará mediante el clonado de los genes de interés en un vector adecuado para su expresión en levaduras seguido por ensayos de complementación y transporte en cepas mutantes de S. cerevisiae. A través de la sobre-expresión de las mismas moléculas en epimastigotes de T. cruzi se podrá validar los datos obtenidos en levaduras y se estudiara además su localización subcelular. Resultados y Conclusiones: Mediante el abordaje experimental mencionado hemos logrado identificar tres nuevos transportadores de T. cruzi pertenecientes a la familia TcAAAP. Estas nuevas moléculas son capaces de incorporar prolina, metionina y aspartato/glutamato, aminoácidos particularmente relevantes en el metabolismo del parasito. Además, estamos diseñando parásitos que sobre-expresan el transportador de arginina y una fusión de dicho transportador con una proteína fluorescente con el fin de comprender como afecta la disponibilidad de arginina en las rutas metabólicas que utilizan este aminoácido y además poner a prueba la hipótesis que los transportadores se acumulan en una región especifica del parasito denominado “bolsillo flagelar” en donde se produce el mayor intercambio con el medio externo. Teniendo en cuenta que esta familia de transportadores se encuentra ausente en humanos podría ser considerada como un potencial blanco para el futuro desarrollo de drogas tripanocidas.