TcNDPK2, una nucleósido difosfato quinasa de Trypanosoma cruzi asociada a los microtúbulos

MIRANDA MR; CAMARA MM; BOUVIER LA; PEREIRA CA

Congreso; XXIV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2010

Las nucleósido difosfato quinasas (NDPKs) son enzimas  encargadas del mantenimiento de nucleósidos di y trifosfato dentro de la célula. En trabajos anteriores hemos reportado la presencia de tres isoformas de esta enzima en el parásito Trypanosoma cruzi, el agente causante de la enfermedad de Chagas. Dos de ellas a las cuales denominadas TcNDPK2 y TcNDPK3 contienen un dominio DM10 en el extremo N-terminal. Si bien la presencia de dicho dominio define un subgrupo dentro de las NDPKs su función aún permanece desconocida. En el presente trabajo nos centramos en el estudio de TcNDPK2 y concluimos que es una NDPK asociada a los microtúbulos del parásito. Mediante diferentes abordajes bioquímicos encontramos que TcNDPK2 queda retenida en fracciones insolubles a altas concentraciones de digitonina y que está presente en muestras de flagelos purificados. Por microscopía de fluorescencia observamos que localiza principalmente en el citoesqueleto y flagelo del parásito. A su vez, mostramos que TcNDPK2 co-precipita con tubulina polimerizada. Finalmente, estudiamos el rol del dominio DM10 a través de la generación de parásitos transgénicos y determinamos que dicho dominio es capaz de direccionar a la proteína reportera GFP al citoesqueleto y flagelo. Se podría especular que la función de esta NDPK en el citoesqueleto está asociada a los procesos de polimerización y remodelación de los microtúbulos.