TcAdk3, una adenilato quinasa de localización glicosomal de Trypanosoma cruzi.

ALINA GIACOMETTI, MARIA DE LOS MILAGROS CAMARA, LEON A BOUVIER, MARIANA MIRANDA, CLAUDIO PEREIRA

Ascochinga

Congreso; XXIV Jornadas de la Sociedad Argentina de Protozoologia; 2010

Sociedad Argentina de Protozoologia

Una de las enzimas responsables de mantener la homeostasis celular de ATP en la célula es la adenilato quinasa, la cual cataliza la interconversión de nucleótidos de adenosina. Las células eucariotas típicas poseen tres isoformas, la variante soluble y las que se encuentran en el espacio intermembrana y en la membrana mitocondrial, sin embargo, en tripanosomátidos, se han identificado por lo menos tres isoformas adicionales. Una de las características únicas de estos organismos es la presencia del glicosoma, una organela donde se realiza la glucolisis, por ello en este trabajo decidimos estudiar la presencia de adenilato quinasas en esta singular estructura. La adenilato quinasa 3 de T. cruzi (TcAdk3), es la única isoforma queT. cruzi (TcAdk3), es la única isoforma que 40 presenta una posible señal de localización glicosomal (PTS-1), sin embargo su secuencia difiere del consenso establecido para estas señales (-CKL). En primer lugar se realizaron ensayos de medición de actividad enzimática que validaron a la enzima como una ADK. Mediante el desarrollo de epimastigotes que expresan a TcAdk3 fusionada a GFP se pudo determinar que dicha isoforma tiene localización glicosomal. Para estudiar si el péptido -CKL era el responsable de dicha localización subcelular, se construyeron mutantes que carecen de dicho péptido, así como también se agrego dicha señal a la GFP. Ambos ensayos demostraron que el péptido -CKL es imprescindible para que TcAdk3 se localice en el glicosoma. El metabolismo compartimentalizado de estos organismos podría explicar la diversidad de isoformas donde cada variante tendría una localización diferencial dentro de la célul