Polisacáridos de la pared celular del alga roja Nemalion helminthoides. Estructura y actividad antiviral in vitro

PÉREZ RECALDE, M.; PUJOL, C.A.; DAMONTE, E.B.; MATULEWICZ, M.C.

Puerto Madryn (Chubut)

Jornada; VI Jornadas Nacionales de Ciencias del Mar; 2006

CENPAT (CONICET), UNPSJB Sede Puerto Madryn, UTN Unidad Académica Chubut

Polisacáridos de la pared celular del alga roja Nemalion helminthoides Estructura y actividad antiviral in vitro M. Pérez Recalde1, C.A. Pujol2, E.B. Damonte2 y M.C.Matulewicz1 1Depto. Química Orgánica, CIHIDECAR, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, UBA mrecalde@qo.fcen.uba.ar 2Lab. de Virología, Depto Química Biológica; Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, UBA Introducción Los polisacáridos sulfatados de algas poseen en mamíferos actividades biológicas/farmacológicas de interés. Ciertos polisacáridos de pared celular de algas rojas marinas son activos contra virus envueltos, tales como Herpes simplex (HSV). En este trabajo se estudiaron polisacáridos de la pared celular del alga roja Nemalion helminthoides, recogida en Miramar (Buenos Aires, Argentina). Metodología El alga se sometió a tres extracciones sucesivas con agua a 90ºC (E1 - E3). E2 se fraccionó con cetrimida para dar una fracción soluble y un precipitado que se disolvió en NaCl 4M. La fracción soluble se purificó por cromatografía de intercambio dando una fracción neutra y otra sulfatada. Las fracciones se analizaron: se determinó el contenido en hidratos de carbono, proteínas, y sulfato, la composición en monosacáridos por cromatografía gaseosa, y el peso molecular. También se estudiaron por RMN 13C, y la fracción neutra por metilación. Se evaluó la actividad de las fracciones contra HSV-1(F) por ensayo de reducción de placas virales en monocapas de células Vero, y a partir de ello se calculó la concentración de compuesto requerida para reducir las placas en un 50 % (CI50). También se evaluó el efecto citotóxico de las fracciones mediante el ensayo de reducción del MTT. Resultados Se determinó la presencia de xilanos neutros b-(1®3)-, b-(1®4)- y los resultados obtenidos hasta el momento sugieren la de xilo-mananos sulfatados. El producto con mayor actividad antiviral fue E3 con una CI50 de 5,0 μg/mL; las CI50 de E2 y E1 fueron 16,5 y 35,5 μg/mL, respectivamente. Las subfracciones de E2 con menor grado de sulfatación presentaron mucha menor actividad antiviral (CI50 > 400 μg/mL). Ninguna fracción resultó citotóxica en las concentraciones ensayadas. Discusión Dado los resultados obtenidos in vitro, sería relevante estudiar la actividad de los compuestos in vivo en animales infectados con virus. También, lograr la desproteinización total de los extractos para adjudicar la actividad unívocamente a  los polisacáridos. Se agradece el apoyo financiero de: ANPCyT (PICT 2003 N° 14237) y de la UBA (X325).