Sialilación selectiva de un hexasacárido unido O-glicosídicamente en las mucinas de Trypanosoma cruzi.

ROSALIA AGUSTI; M. EUGENIA GIORGI; GUSTAVO A. KASHIWAGI; VERÓNICA M. MENDOZA; CAROLA GALLO -RODRIGUEZ; ROSA M. DE LEDERKREMER

Villa Carlos Paz

Congreso; XVIII Simposio Nacional de Química Orgánica; 2011

SAIQO

Trypanosoma cruzi, el agente de la Enfermedad de Chagas, expresa en su superficie una enzima de características únicas, capaz de transferir ácido siálico desde los glicoconjugados del huésped hacia las mucinas del parásito.1 Las cadenas O-glicosídicas de estas mucinas están unidas a la proteína a través de una α-GlcNAc y pueden derivarse en dos estructuras conservadas, Galp(β1→4)GlcNAc o Galf(β→4)GlcNAc que son posteriormente ramificadas con varias unidades de Galf o Galp, estando la presencia de Galf relacionada con el grupo al que pertenece la cepa de T. cruzi.2 En nuestro laboratorio, hemos sintetizado los oligosacáridos con Galf y estudiado su capacidad de comportarse como sustratos en la reacción de trans-sialidación.3 En el presente trabajo se realizaron estudios de trans-sialidación del compuesto 1 que posee 2 Galp terminales4 y cuya síntesis se describe en otra comunicación (Kashiwagi et al). La trans-sialidación se llevó a cabo utilizando 3?-sialilactosa como donor de siálico y la enzima recombinante. Por purificación del producto de reacción por columna de intercambio aniónico (AG1X2, forma acetato) se obtuvo 2 cuya estructura se determinó por RMN mono y bidimensional y espectroscopía de masas de alta resolución (ESI-MS). Se encontró que 1 se monosialila en la posición 3 del residuo de galactosa unido (β13). Se determinaron sus constantes cinéticas y de inhibición, KM e IC50. La sialilación, purificación e incubaciones para los estudios cinéticos se monitorearon por cromatografía de intercambio aniónico de alta resolución (HPAEC-PAD).