Modelo murino de preservación y recuperación de pulmones donantes mediante terapia con células madre mesenquimales humanas.

MARCOS M.; YANNARELLI G.; ROBLEDO O.; PACIENZA N.; SANTA-CRUZ D.; MALVICINI R.

Buenos Aires

Congreso; XVIII Congreso nacional de la asociación de veterinarios especializados en animales de compañía de Argentina (AVEACA); 2018

AVEACA

Introduccióny Objetivos del estudio: El trasplante de pulmón es la terapia de elección parasalvar la vida de pacientes que padecen enfermedades pulmonares en etapaavanzada. En Argentina, solo el 15% de los pulmones provenientes de donantesmultiorgánicos son aptos para trasplante, en consecuencia, la mortalidad enlista de espera alcanza el 30%. En este sentido, no solo un aumento en laprocuración de órganos solucionaría el déficit de pulmones a nivel clínico,sino que la implementación de técnicas que mejoren el proceso de preservación oque permitan recuperar funcionalmente al órgano donado tendría gran impacto.Por este motivo, en el presente trabajo proponemos aumentar la disponibilidadde pulmones para implante mediante administración de células madremesenquimales derivadas de cordón umbilical humano (HUCPVCs) a órganos queactualmente se descartan, ya sea por no ser aptos para trasplante o porqueprovienen de donantes en asistolia. Para tal fin, el uso de mamíferos pequeñosnos permitió evaluar la factibilidad de este tipo de terapias y estudiar ademáslos mecanismos moleculares implicados. Materiales y métodos: Desarrollamos unmodelo de perfusión pulmonar ex vivo en ratas que simula las diferentes etapasque los órganos donantes deben atravesar antes de su implantación al aceptor.Se instrumentaron 30 ratas Wistar de 12 semanas de edad (~300 g), 10 animalespor grupo experimental (Basal, PBS y HUCPVCs), libres de patógenos y criadasbajo condiciones controladas en el bioterio de la Universidad de La Plata. Elabordaje quirúrgico incluyo intubación de la tráquea, toracotomía, extraccióndel paquete cardio-pulmonar, y canulación de la arteria pulmonar, manteniendolos pulmones en condición de semi-inflado a lo largo de toda la experiencia.Las distintas etapas del modelo desarrollado fueron: paro cardíaco, isquemiacaliente (2 h, TA), isquemia fría (1,5 h, 4°C), reclutamiento alveolarescalonado y reperfusión pulmonar con ventilación mecánica (solución de Steen,1 h TA). La intervención terapéutica se llevó a cabo después de 1 h de isquemiacaliente mediante infusión de 1x106 células (HUCPVCs), o solución salina (PBS),a través de la arteria pulmonar. La ventilación mecánica se realizó con unrespirador especialmente diseñado para animales pequeños (Somno-Suite, KentScientific Corporation) y la reperfusión se realizó mediante bomba peristáltica(flujo: 1,0 ml.min-1) manteniendo cuidadosamente la presión de perfusión pordebajo de los 15 cm H2O. Los datos fisiológicos (curvas presión-volumen ycompliance pulmonar) fueron adquiridos inmediatamente después del paro cardíacoy una vez finalizada la reperfusión. El edema pulmonar (relación peso fresco/peso seco) y la infiltración de neutrófilos se determinaron a partir debiopsias pulmonares. Resultados: se logró establecer un modelo de perfusiónpulmonar ex vivo en ratas para evaluar la terapia con HUCPVCs, pero que ademáspodrá utilizarse para valorar otras estrategias terapéuticas. Aunque el edemapulmonar fue similar entre los diferentes grupos, la infusión de HUCPVCspreservó la histología pulmonar y disminuyó la infiltración de neutrófilos en un40% en comparación con PBS (p