Actividad y expresión de subtilisinas durante la germinación de granos de cebada

FLAVIO H. GUTIERREZ BOEM; GALOTTA, M. F.; ROBERTS, I.; PABLO PRYSTUPA

Corrientes

Congreso; XXXI Reunión Argentina de Fisiología Vegetal; 2016

SAFV

El espectro de proteasas activasdurante la germinación es una mezcla compleja de enzimas cuya identidad siguesiendo mayormente desconocida. El objetivo del trabajo fue determinar lacontribución de las serín-proteasas a la actividad proteolítica total durantela germinación de granos de cebada e indagar en la participación de lassubtilisinas (familia S8A de las serín-proteasas) en dicho proceso. Con estefin, se midió la actividad proteolítica en extractos solubles de granos engerminación, usando diferentes sustratos e inhibidores de proteasas. Losresultados mostraron que la actividad de proteasas sobre azocaseína aumenta casi8 veces al día 5 de germinación, representando las serín-proteasas un 20% de laactividad total. Con el sustrato AAPFpNA se observó un aumento en la actividadde subtilisinas al día 5 de aproximadamente 6 veces respecto del día 0. Porotro lado, se analizó la expresión por RT-PCR de 39 genes codificantes parasubtilisinas encontrando que 14 de ellos aumentaron su expresión durante lagerminación, mientras que 4 se vieron reprimidos, 8 no mostraron variación, y los13 restantes no se expresaron. Estos resultados indican una participaciónactiva de las serín-proteasas, y en particular de las subtilisinas, en lagerminación de los granos de cebada.