La Expresión Génica de HO-1 no Está Restringida Epigeneticamente y Requiere Factores de Transcripción Relacionados a Estrés en Plantas de Soja Sometidas a Radiación Ultravioleta-B

NATALIA PACIENZA; KARINA BALESTRASSE; DIEGO SANTA CRUZ; EDUARDO PAGANO ; CARLA ZILLI; GUSTAVO YANNARELLI

Granada

Congreso; XI Reunion Anual del Grupo Español de Investigación en Radicales Libres; 2016

CSIC

La enzima Hemooxigenasa-1 (HO-1) juega un rol protector frente al estrés oxidativo en plantas. Sin embargo, los mecanismos que regulan su expresión génica han sido poco estudiados. En el presente trabajo investigamos el estado de metilación de una región rica en CG del promotor de HO-1 y la expresión de factores de transcripción (TFs) en plantas de soja sometidas a estrés por radiación ultravioleta-B (UV-B). El ADN genómico y el ARN total fue aislado de hojas de plantas irradiadas con 7.5 y 15 kJ.m-2 UV-B. El ADN fue tratado con bisulfito de sodio y una región promotora de 304 pares de bases fue amplificada mediante PCR, clonada en un vector plasmídico pGEM-T y analizada por secuenciación de ADN. El análisis de la secuenciación mostró niveles de metilación del promotor de HO-1 similares en plantas control y tratadas con las diferentes dosis de UV-B (C: 3.0±0.6%; 7.5: 3.14±0.5%; 15: 2.9±0.5%). Es interesante notar que el promotor de HO-1 se encontró fuertemente demetilado en el grupo control. Posteriormente, se estudió mediante RT-PCR cuantitativa la expresión génica de un grupo de TFs relacionados a estrés por calor, sequía y salinidad pero no habían sido estudiados frente a estrés por radiación UV-B (GmMYB177, GmMYBJ6, GmWRKY21 y GmWRK13). Se observó que los tres primeros responden a estrés por UV-B y mediarían la sobre-expresión de HO-1. En conjunto, estos resultados demuestran que la HO-1 no estaría regulada de una manera epigenética. Más aun, los bajos niveles de metilación del promotor sugieren que esta enzima puede responder rápidamente a fin de paliar el estrés ambiental. Finalmente, este trabajo permitió identificar algunos TFs involucrados en la sobre-expresión de HO-1 en respuesta a la radiación UV-B.