ESTUDIO DEL COMPORTAMIENTO DE LAS DISTINTAS ISOFORMAS DE LA GLUTAMINA SINTETASA EN HOJAS DE PLANTAS JÓVENES DE TRIGO (Triticum aestivum L.) EN REPUESTA A LA DISPONIBILIDAD DE NITRÓGENO

M. ALEJANDRA GELSO; CARLA CAPUTO; ATILIO J. BARNEIX

Rosario, Santa Fé, Argentina

Congreso; XIII Reunión Latinoamericana, XXVII Reunión Argentina de Fisiología Vegetal; 2008

Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal

La Glutamina Sintetasa es una enzima clave del metabolismo del nitrógeno (N) y las distintas isoformas muestran diferencias en sus patrones de expresión en función del estadio de desarrollo y las condiciones ambientales. Con el fin estudiar la participación de cada isoforma en la respuesta a cambios en la disponibilidad de N, se cultivaron plantas en condiciones controladas y regadas con solución nutritiva conteniendo 1, 2, 4, 8 o 16 mM KNO3 por 17 días, momento en que se realizó un muestreo en condiciones de crecimiento estacionario y se reemplazo la solución nutritiva por otra carente de nitrato, para evaluar el efecto de dos días de hambreado de N. La detección de las distintas isoformas se realizó por Western Blot usando un anticuerpo anti-GS2 de trigo obtenido luego de la purificación de la enzima a partir de hojas de plantas jóvenes. El anticuerpo reveló en extractos de hojas tres bandas de 45, 42 y 39 kDa, correspondientes a la isoforma cloroplástica (GS2) y las isoformas citosólicas predominantes en raíz (GSr) o en hoja (GS1), respectivamente. La expresión de GS2 se mantuvo constante en todos los niveles de N menos en las plantas cultivadas con 1 mM de N donde fue levemente inferior. En cambio se observó una disminución de la expresión tanto de GSr como de GS1 con el aumento en la disponibilidad de N. Esta represión fue más pronunciada en el caso de la GS1 ya que solo se observó presencia de banda en las plantas cultivadas con 1, 2 o 4 mM de N. El hambreado de N no generó ningún cambio significativo en la expresión de GS2, mientras que la expresión de GS1 aumentó en todos los niveles de N y la expresión de GSr solo aumentó en las plantas cultivadas con bajo N. Estos resultados estarían indicando un comportamiento diferencial de cada isoforma en el metabolismo del N y sugieren un rol importante de la GS1 en la respuesta de la planta ante un estrés de N.