INBA   12521
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN BIOCIENCIAS AGRICOLAS Y AMBIENTALES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
IDENTIFICACIÓN Y ANÁLISIS DE LA EXPRESIÓN DE TRES PROTEASAS TIPO SUBTILISINA EN HOJAS SENESCENTES DE TRIGO
Autor/es:
MARÍA JIMENA RUIZ DIAZ; IRMA N. ROBERTS
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; XXIX Reunión Argentina de Fisiología Vegetal; 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal
Resumen:
Las serín proteasas vegetales se dividen en 14 familias, de las cuales la familia S8 (subtilisinas) es una de las más numerosas. Las subtilisinas reciben su nombre de la subtilisina de Bacillus subtilis que fue la primera en ser aislada. En plantas se denominan subtilisinas vegetales o subtilasas. A pesar de que se trata de un grupo bastante numeroso, a la mayoría no se le conoce su función biológica. En trabajos previos pudimos demostrar que existe una clara correlación entre la actividad de dos proteasas tipo subtilisina (denominadas P1 y P2) y el desarrollo de la senescencia en plantas de trigo. El objetivo de este trabajo fue identificar secuencias codificantes para proteasas tipo subtilisina en bases de datos de trigo y analizar su expresión durante la senescencia foliar. Para ello se utilizó la secuencia previamente obtenida de un fragmento de 17 aminoácidos de la proteasa P1 (APEIFKPDVTAPGVDIL) para realizar una búsqueda de secuencias homólogas en bases de datos de trigo usando el software BLAST. Se obtuvieron tres secuencias que contienen dicho fragmento: TA83755_4565, TA83756_4565 y TA83757_4565. El análisis de comparación de secuencias utilizando el programa ClustalW2 mostró que a pesar de presentar alta homología (entre 78 y 90%) estas secuencias corresponden a tres genes diferentes. A partir de dichas secuencias se diseñaron ?primers? específicos con el software OligoPerfect? Designer con el fin de estudiar su expresión por RT-PCR en hojas de trigo. Se trabajó con hojas verdes y senescentes de plantas de trigo jóvenes y en etapa de espigazón cultivadas en cámara de cultivo e invernáculo, respectivamente. Se pudo observar que dos de las secuencias estudiadas (TA83757_4565 y TA83755_4565) presentan muy bajos niveles de expresión en hojas verdes y muestran una fuerte inducción en hojas senescentes, tanto en las plantas jóvenes como adultas. En contraposición, no se detectó expresión de TA83756_4565 en ninguno de los tejidos analizados.