DETECCIÓN, AISLAMIENTO, CULTIVO Y CARACTERIZACIÓN DE UNA CEPA DE MICROCYSTIS AERUGINOSA EN LA PROV. DE BS AS-ARGENTINA

ROSSO, L; KOLMAN, MA; SEDAN, D; SALERNO, G; GIANNUZI, L; ECHENIQUE R; ANDRINOLO D

Montevideo, Uruguay

Encuentro; I Encuentro Uruguayo de Cianobacterias: del conocimiento a la gestion; 2010

LATU

En junio de 2004 fue localizado en una banquina de la localidad de Pila, Provincia de Buenos Aires un desarrollo masivo, muy significativo, de algas planctónicas. Previendo que dicha floración fuese consecuencia de alguna Cyanobacteria, por solicitud de la Municipalidad, se llevó a cabo la toma de muestras a fin de determinar el taxón responsable del fenómeno y estimar su “peligrosidad” y probables riesgos hacia la comunidad. Los estudios llevados a cabo incluyeron el análisis microscópico, cualitativo y cuantitativo del fitoplancton, evaluación de parámetros físico-químicos y de toxicidad. Los análisis microscópicos determinaron que la floración era producida por una cepa de Microcystis aeruginosa. La evaluación de toxicidad, llevada a cabo mediante ensayo ratón resultó positiva para hepatotoxinas. Sobre material liofilizado, se realizaron estudios analíticos mediante Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC). De los mismos se determinó la presencia de microcistina XR y LA. Se aislaron distintas colonias y se pusieron en varios medios, J, Z8, y BG11. La cepa creció en medio BG11. Células aisladas de una sola colonia fueron cultivadas en condiciones estériles no axénicas. Las células fueron mantenidas en tubos de vidrio y luego traspasadas a Erlenmeyer sin agitación a 30ºC con ciclos de luz oscuridad 14/10 hs y una intensidad de luz de 30 µE m-2 s -1 . Se realizaron las curvas de crecimiento y se evaluó la producción de toxinas en condiciones de cultivo. Confirmándose que la cepa es productora de microcystinas XR y LA. La identificación molecular de la muestra aislada en la localidad de Pila, así como la evaluación de las relaciones filogenéticas, fue realizada a partir de las secuencias obtenidas de las mini- bibliotecas genómicas construídas mediante la amplificación de la región espaciadora entre los genes cpcA y cpcB (cpcBA-IGS). Mediante la amplificación por PCR, se determinó la presencia del gen mcyA, uno de los integrantes de operón de microcistina (mcy). El aislamiento realizado de la muestra obtenida en la localidad de Pila es similar en un 97% a la especie Microsystis aeruginosa. La presencia del gen mcyA estaria indicando la potencial toxicidad de este aislamiento. Según nuestro conocimiento esta sería la primera cepa de Microcystis aeruginosa aislada del ambiente y puesta en cultivo en Argentina. El desarrollo de las capacidades regionales de cultivo de cianobacterias toxígenas es un paso necesario para realizar investigación cientifca y tecnológica. Consideramos que es necesario construir un Centro Argentino de Algas Toxígenas (CAAT) que posibilite la generación y mantención de un cepario de cianobacterias. Por esto la cepa fue denominada provisoriamente CAAT 2005-3.