La reprogramación metabólica inducida por hipoxia cambia la potencia de fármacos citotóxicos en células de pacientes con LLC.

GIL FOLGAR M; MAIGUA G; BLANCO G; KORNBLIHTT L; MALUSARDI C; ROJAS F; LOMBARDO T; MINISSALE C ; CABRAL LORENZO MC

Mendoza

Congreso; XXIV Congreso Argentino de Hematología; 2019

Sociedad Argentina de Hematología

IntroducciónLas células de LLC pueden tolerar la hipoxia por su capacidad de obtener ATP dela glucólisis, convirtiendo a las mitocondrias en organelas con funciónprincipalmente anabólica en lugar de bioenergética y promoviendo así lasupervivencia y el crecimiento celular. Dado que la mayoría de las drogascitotóxicas inducen apoptosis mitocondrial, la reprogramación metabólicainducida por la hipoxia podría alterar tanto la potencia de drogas con blancoen la mitocondria (trióxido de arsénico, ATO) como con acción sobre lasrespuestas de estrés celular como la mitofagia y autofagia (vincristina, VCR),la biogénesis mitocondrial (ácido valproico, VPA) y el sistemaubiquitina-proteasoma (MG132). Además, estos cambios podrían ser diferentes enlos pacientes con enfermedad estable actualmente sin tratamiento (NAD) de lospacientes con enfermedad activa que requieren medicamento (ADT).ObjetivosEvaluar la potencia de los fármacos trióxido de arsénico (ATO), ácido valproico(VPA), vincristina (VCR) y MG132 en forma individual y combinada, en pacientescon LLC con NAD y ADT, para determinar si hay diferencias entre ambos gruposdespués de inducir la reprogramación metabólica por hipoxia.Material y métodosLas células patológicas obtenidas de sangre periférica de 9 pacientes con LLC,se expusieron a dosis crecientes de fármacos solos o combinados durante 72 hsen normoxia o hipoxia. Se evaluó el nivel citotóxico con efecto 50% para cadadosis mediante citometría de flujo. Para la potencia de las drogas se evaluó laconcentración citotóxica (EC50), el índice de combinación (CI50) e índice dereducción de dosis (DRI50), totalizando 21 mediciones por paciente. Ellogaritmo de la relación normoxia vs hipoxia (LogN/H) se utilizó para compararlos cambios entre pacientes de los grupos NAD (5 pac) y ADT (4 pac) aplicandoel test de Mann-Whitney.Resultados1) El grupo de pacientes ADT mostró un aumento de la potencia individual deMG132 bajo hipoxia, que fue significativamente mayor a la del grupo NAD(mediana LogN/H 1.51 vs -0.134 respectivamente; p < 0.05). Los restantesfármacos evaluados como monodrogas no mostraron cambios de potenciaestadísticamente significativos entre normoxia e hipoxia.2) En ensayos de combinación de dos fármacos, bajo hipoxia el grupo ADT mostróun aumento del antagonismo con ATO + VPA en comparación con el grupo NAD(mediana LogN/H 0.164 vs-0.009 respectivamente; p < 0.05). Los cambios enlas otras combinaciones de dos fármacos no tuvieron significación estadística.3) En los ensayos combinando tres fármacos, bajo hipoxia el grupo ADT mostró unaumento del antagonismo con ATO + VPA + VCR en comparación con el grupo NAD(mediana LogN/H 0.717 vs-0.057 respectivamente, p < 0.05), mientras que lacombinación de cuatro fármacos no mostró cambios estadísticamente significativos.4) Bajo hipoxia, el DRI50 (potencia relativa) de ATO disminuyó en el grupo ADTen la combinación de tres fármacos ATO+VPA+VCR comparado con el grupo NAD(mediana LogN/H -0.007 vs 1.331; p < 0.05) y la misma disminución de DRI50se observó con VPA en el grupo ADT (mediana LogN/H -1.131 vs 0.498; p