IDEHU   05542
INSTITUTO DE ESTUDIOS DE LA INMUNIDAD HUMORAL PROF. RICARDO A. MARGNI
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
“Brucella infecta e induce una leve respuesta inflamatoria en células epiteliales intestinales humanas”
Autor/es:
FERRERO MC; RUMBO M; FOSSATI CA; BALDI PC
Lugar:
Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina
Reunión:
Congreso; LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Inmunología
Resumen:
Brucella infecta e induce una leve respuesta inflamatoria en células epiteliales intestinales humanas Ferrero MC, Rumbo M, Fossati CA, Baldi PC En el hombre, una de las formas más comunes de contagio de la brucelosis es el consumo de alimentos contaminados con Brucella spp. Investigamos la capacidad de la cepa lisa B. abortus 2308 y las cepas rugosas B. abortus RB51 y B canis para infectar, replicar e inducir la secreción de citoquinas en las líneas de células epiteliales intestinales humanas Caco-2 y HT-29. Las células fueron infectadas 16 hs. a una razón de 200 bacterias/célula. A las 2, 24 y 48 hs. posinfección (p.i.) se cuantificaron las bacterias intracelulares por ensayos de protección con gentamicina. Las cepas ensayadas se adhieren e invaden las células Caco-2 y HT29. La adherencia de las cepas rugosas fue mayor que la de la cepa lisa (6.5 ±0.7 x107 para B. canis y 5.7 ±0.2 x107 para RB51 vs. 5.6±0.9 x106 UFC/ml para la cepa lisa), y lo mismo ocurrió con la invasión (7.9 ±2.6 x106 para B. canis y 9.0 ±1.0 x106 para RB51 vs. 2.4±0.4 x103 UFC/ml de la cepa lisa) en HT-29. La invasión dependió de los microfilamentos y microtúbulos ya que la misma fue inhibida en un 90±0.8% con 2 ug/ml de citocalasina D y en un 52±1.3% con 10 uM de colchicina. Sólo la cepa lisa replicó intracelularmente (UFC aumentaron ~2 log a 48 hs p.i) en HT-29. Resultados similares se encontraron para Caco-2. La infección indujo una producción moderada de IL-8 (513.0±11.3 pg/ml para B. abortus 2308, 677.5±57.28 pg/ml para B. canis y 1243±14.8 pg/ml para RB51 a 48 hs. p.i.) y una baja secreción de GM-CSF (12.61±1.17 pg/ml para B. abortus 2308, 11.37±0.70 pg/ml para B. canis, 15.06 ± 1.74 pg/ml para RB51) en HT-29. La inducción de citoquinas dependió de la viabilidad bacteriana (B. abortus muerta por calor no indujo citoquinas) pero no del sistema de secreción de tipo IV ni de la replicación intracelular, ya que la cepa mutada en virB10 (incapaz de replicar en HT-29) indujo niveles de citoquinas similares a la cepa salvaje. La infección de Caco-2 no indujo secreción de citoquinas. consumo de alimentos contaminados con Brucella spp. Investigamos la capacidad de la cepa lisa B. abortus 2308 y las cepas rugosas B. abortus RB51 y B canis para infectar, replicar e inducir la secreción de citoquinas en las líneas de células epiteliales intestinales humanas Caco-2 y HT-29. Las células fueron infectadas 16 hs. a una razón de 200 bacterias/célula. A las 2, 24 y 48 hs. posinfección (p.i.) se cuantificaron las bacterias intracelulares por ensayos de protección con gentamicina. Las cepas ensayadas se adhieren e invaden las células Caco-2 y HT29. La adherencia de las cepas rugosas fue mayor que la de la cepa lisa (6.5 ±0.7 x107 para B. canis y 5.7 ±0.2 x107 para RB51 vs. 5.6±0.9 x106 UFC/ml para la cepa lisa), y lo mismo ocurrió con la invasión (7.9 ±2.6 x106 para B. canis y 9.0 ±1.0 x106 para RB51 vs. 2.4±0.4 x103 UFC/ml de la cepa lisa) en HT-29. La invasión dependió de los microfilamentos y microtúbulos ya que la misma fue inhibida en un 90±0.8% con 2 ug/ml de citocalasina D y en un 52±1.3% con 10 uM de colchicina. Sólo la cepa lisa replicó intracelularmente (UFC aumentaron ~2 log a 48 hs p.i) en HT-29. Resultados similares se encontraron para Caco-2. La infección indujo una producción moderada de IL-8 (513.0±11.3 pg/ml para B. abortus 2308, 677.5±57.28 pg/ml para B. canis y 1243±14.8 pg/ml para RB51 a 48 hs. p.i.) y una baja secreción de GM-CSF (12.61±1.17 pg/ml para B. abortus 2308, 11.37±0.70 pg/ml para B. canis, 15.06 ± 1.74 pg/ml para RB51) en HT-29. La inducción de citoquinas dependió de la viabilidad bacteriana (B. abortus muerta por calor no indujo citoquinas) pero no del sistema de secreción de tipo IV ni de la replicación intracelular, ya que la cepa mutada en virB10 (incapaz de replicar en HT-29) indujo niveles de citoquinas similares a la cepa salvaje. La infección de Caco-2 no indujo secreción de citoquinas.