- Inhibidores de NF-kB y proteosoma sensibilizan la muerte apopt¨®tica por IFN de tipo I en C¨¦lulas de una l¨ªnea linfoblstoide humana.

SIMUNOVICH T,; PAPADEMETRIO D,; LOMBARDO T; COSTANTINO S.,; CAVALIERE V; ALVAREZ E.

Mar del Plata Argentina

Congreso; Reuni¨®n Anual Conjunta SAI SAIC; 2009

SAI -SAIC

En leucemias de origen linfoblastoide B asociadas a EBV, la activaci¨®n constitutiva del factor NF-kB promueve su sobrevida y facilita la evasi¨®n a la apoptosis. Los IFN tipo I presentan capacidad inmunomoduladora y antiproliferativa siendo utilizados en infecciones virales y como agentes antineopl¨¢sicos. La falta de respuesta al tratamiento con IFN tipo I en ciertas neoplasias linfoblastoides, y su susceptibilidad a inhibidores de NF-kB y de proteasoma, ha permitido hipotetizar sobre  una posible sensibilizaci¨®n del uso combinado. El objetivo fue evaluar el efecto de la combinaci¨®n de IFN tipo I con CAPE (¨¢cido cafe¨ªn-fenil-etil-¨¦ster), inhibidor de NF-kB, y MG132, inhibidor del proteasoma, sobre la proliferaci¨®n celular y la inducci¨®n de apoptosis en la l¨ªnea linfoblastoidea B humana, PL104, EBV+. Se determin¨® la inhibici¨®n de la proliferaci¨®n celular, por incorporaci¨®n de 3H-T, a 24 y 48 hs con IFN¦Á y ¦Â (0 a 100.000 UI/ml), CAPE (0 a 100 ¦Ìg/ml), MG132 (0 a 8 ¦ÌM)y sus combinaciones. Los resultados indicaron que los IFN¦Á y ¦Â alcanzan una inhibici¨®n m¨¢xima de 39% y 55% (p<0.001) respectivamente a las 24hs. Siendo para las dosis de 1000 UI/ml de 18 % y 33 %, increment¨¢ndose al combinarlo con CAPE (15 ¦Ìg/ml) a 51% y con MG132 (1,5 ¦ÌM) a 75% (p<0.01). Mientras que a 48 hs las combinaciones alcanzan 64% y 99% (p<0.001) respectivamente. La apoptosis fue evaluada por Annexin V-FITC a 24 y 48 hs. Encontramos que los IFNs no inducen muerte apopt¨®tica. Tampoco la combinaci¨®n de cada uno (1000 UI/ml) con CAPE (15 ¦Ìg/ml) ya que los valores fueron de (2,2 ¡À 1,1)% con IFN¦Á y (5,3¡À2,3)% con IFN¦Â (p<0.001) a las 48 hs. En cambio, al combinarlos con MG132 (1,5¦ÌM) los aumentos resultaron significativos (62,0¡À2,3)% para IFN¦Á y (65,7¡À2,3)% para IFN¦Â (p<0.01)Se concluye que el tratamiento con IFN tipo I inhibe el crecimiento sin causar muerte apopt¨®tica a los tiempos ensayados. Sin embargo la combinaci¨®n con una dosis sensibilizante de MG132 aumenta el efecto apopt¨®tico de los mismos.