Modulación de los efectos citotóxicos del arsenito de sodio por inhibidores del NF-KB en la línea promonocítica humana U937

LOMBARDO T.,; CAVALIERE V.; PAPADEMETRIO D; COSTANTINO S.; SCARLATO E.,; ALVAREZ E; BLANCO G.

Mar del Plata Argentina

Congreso; Reunión Anual conjunta SAI SAIC; 2009

El Arsénico en su forma 3+(ej. AsNa) mostró eficacia en el tratamiento de Leucemia Promielocítica pero la aparición de resistencia farmacológica y efectos adversos limitan una aplicación más difundida y eficaz. Los inhibidores de NF-kB como el Ácido Cafein-fenil-etil-éster (CAPE) y el péptido, inhibidor del proteasoma, MG132 han sido propuestos como drogas sensibilizantes. Nuestro objetivo fue determinar, mediante el uso de Isobologramas y Coeficientes de Interacción (CI), la presencia de sinergismo, antagonismo o aditividad en combinaciones AsNa-MG132 y AsNa-CAPE. Para esto las células de línea promonocítica U937 se expusieron separadamente a un rango de 7 dosis por triplicado de AsNa, MG132 y CAPE durante 72h a 37ºC. Se determinó el porcentaje de muerte con Fluoresceína Diacetato (FDA) y Ioduro de Propidio (IP) con un posterior análisis por citometría de flujo. La Dosis Letal 50 (DL50) se calculó por regresión lineal logarítmica para las 3 drogas. Con estos datos se construyeron isobologramas para determinar la DL50 teórica de las combinaciones y se definió la proporción relativa de cada droga a utilizar en los ensayos combinados. Luego se expusieron las células a un rango de 7 dosis por encima y debajo de la DL50 teórica por triplicado para cada combinación, evaluándose la muerte celular con FDA-IP por citometría de flujo. Las DL50 de AsNa, MG132 y CAPE fueron  7,37uM, 2,13uM y 254uM respectivamente. Las pendientes de regresión fueron m=0.68 m=1.51 y m=7.17 sugiriendo distintos mecanismos citotóxicos entre las 3 drogas y especialmente entre CAPE y MG132. El CI entre AsNa y MG132 varió de 0,83 (DL10) a 0,46 (DL90) indicando un marcado sinergismo entre las dos drogas, mientras que el CI entre AsNa y CAPE estuvo entre 2,17 y 1,19 indicando antagonismo.Concluimos que sólo MG132 resultó sinérgico con AsNa mientras que CAPE mostró  antagonismo sugiriendo que la combinación AsNa-MG132 sería la más promisoria para mejorar el tratamiento de Leucemia Promielocitica.