rTgPI-1 combinada con aluminio y ODN-CpG en un protocolo de prime-boost provee protección frente al infección toxoplásmica a ratones C57BL/6

SANCHEZ V; GONZALEZ COBIELLO PL; FENOY I; FRANK FM; GOLDMAN A; MARTIN V

Santa Fe

Congreso; XXIII Reunion Cientifica Anual de la Sociedad Argentina de Protozzología; 2009

SAP

T. gondii es un protozoario que infecta al hospedador mediante la ingestión oral de quistes tisulares u ooquistes induciendo una fuerte respuesta inmune tipo Th1 y confiere inmunidad contra una re-infección. Los ODN-CpG sintéticos son capaces de promover respuestas Th1, necesarias para el diseño de vacunas contra patógenos intracelulares. Previamente demostramos que una forma recombinante del inhibidor de serin proteasas-1 (rTgPI-1) de T. gondii combinado con aluminio, genera una respuesta inmune que resulta en protección contra la infección a ratones C3H/HeN. En este trabajo, se evaluó la capacidad de rTgPI-1 combinado con hidróxido de aluminio y ODN-CpG en un protocolo de “prime boost”, en conferir protección frente a la infección a ratones C57BL/6 altamente susceptibles. Para esto, ratones hembras fueron inmunizados con 2 dosis de rTgPI-1+alum o sin adyuvante por vía intradérmica (id) mas 2 dosis de rTgPI-1+CpG por vía intranasal (in) (G1 y G2) y se emplearon como grupos control, ratones inmunizados con 4 dosis de rTgPI-1+alum id (G3), o rTgPI-1 id (G4) o rTgPI-1+CpG in (G5), o PBS (G6). Los ratones de los grupos G1-4  mostraron altos niveles de anticuerpos específicos medidos por ELISA directo, presentando G3 un perfil asociado a un tipo de respuesta Th2, G4 un perfil mixto Th1/Th2, y ambos protocolos de prime-boost G1 y G2 mostraron un perfil asociado a una respuesta Th1. En los ratones inmunes se observó una significativa respuesta celular frente a antígenos excretados-secretados de T. gondii (ESA) medida por DTH. Catorce días luego del último refuerzo, los ratones se desafiaron por vía oral con quistes de la cepa Me49 y se midió el nivel de protección conferido mediante el conteo de quistes en cerebro. Las inmunizaciones por una única vía no resultaron en una reducción significativa de la parasitemia: 13% (G3) y 22% (G5), mientras ambos protocolos de prime-boost generaron una reducción significativa de 49% (G2) y 55% (G1) comparado con el control G6. Estos resultados demuestran que la combinación de rTgPI-1 con dos tipos de adyuvante en este protocolo de “prime-boost”, induce una respuesta inmune capaz de conferir protección frente a la infección por T. gondii a ratones C57BL/6.