INTERACCION IN VIVO Y ANALISIS BIOFISICO POR RESONSNCIA PLASMATICA DE SUPERFICIE DE UN NUEVO SAG DEL GRUPO II, SER, CON EL TCR MURINO VBETA8.2.

CHIAPPINI SA; ROMASANTA PN; BAUER AB; DE MARZI MC; FERNÁNDEZ MM; MALCHIODI EL

Mar Del Plata, Prov de Buenos Aires

Congreso; 57 Reunion Anual SAI; 2009

Sociedad Argentina de Inmunolog¨ªa

Los  SAgs bacterianos son toxinas capaces de disparar una respuesta inmune masiva por estimulacion de poblaciones de linfocitos T que poseen determinado Vbeta en su receptor de superficie TCR. Los SAgs son letales por producir sindrome de shock toxico, pero tambien estan estrechamente vinculados con procesos autoinmunes (diabetes mellitus, artritis reumatoidea y esclerosis multiple) debido a la posible activacion de LT especificos para autoantigenos. El potencial uso de los SAg y TCRs solubles en estas patologias como agentes terapeuticos hacen que el estudio biofisico de estos sea de gran importancia. SER es un nuevo integrante del Grupo II junto a SEB, SEC1-3, SSA, SPE-A y SEG, con este ultimo y debido a la similitud de su secuencia aa, forman un nuevo subgrupo. El Grupo II reacciona con la cadena murina Vb8.2, el principal TCR involucrado en el modelo raton para esclerosis multiple. Demostramos que SEG presenta interaccion diferencial con Vb8.2 y al resolver la estructura tridimensional de SEG-Vb8.2, observamos diferencias sustanciales con las presentes en otros complejos. Los objetivos del presente trabajo fueron  caracterizar biofisica y biologicamente a SER y determinar si presenta el mismo comportamiento diferencial de SEG, caracterizando al nuevo subgrupo. Para ello, clonamos y expresamos a SER en forma soluble, el que fue inyectado a ratones BALB/c y mediante citometria de flujo se determino que: SER interacciona con Vb8.2 teniendo el pico de proliferacion 48hs post infeccion y sin actividad a dia 4 como ocurre con los otros SAgs, caracteristica compartida por SEG. Mediante SPR se determino la afinidad de SER por Vb8.2 y por L2CM, una mutante de Vb8.2 que presenta una mayor afinidad por los SAgs solo cuando el sitio de interaccion convencional se encuentra conservado. La KD determinada en ambas mediciones fue de 17 uM. Estos resultados sugeririan que SER presentaria un comportamiento similar a SEG desde el punto de vista biologico como estructural.