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Antecedentes La mayoría delos fármacos para tratamiento de linfomas y otras neoplasias hematológicasinducen apoptosis intrínseca, un tipo de muerte celular regulada que se iniciaen las mitocondrias tras el colapso del potencial de membrana mitocondrial(MMP). Pero las células de linfoma de Burkitt (CLB) y de otros linfomasagresivos pueden no iniciar la apoptosis, debido a que eliminan las mitocondriasen los lisosomas por un mecanismo denominado mitofagia (autofagia selectiva demitocondrias) y las reemplazan por otras de nueva formación (biogénesismitocondrial). CCCP es un compuesto químico que causa colapso del MMP(despolarización), generando un intenso recambio mitocondrial mediantemitofagia y biogénesis.Objetivo Analizamos lacapacidad de las CLB para tolerar la despolarización por CCCP, y evaluamos siel bloqueo de la mitofagia o de la biogénesis influye en la tolerancia a CCCP.Métodos Se evaluó elefecto inmediato (1h) y diferido (72h) de CCCP (5 μM a 50 μM) sobre CLB por citometríade flujo y microscopía de fluorescencia, luego de la marcación con variassondas fluorescentes. Se evaluó MMP con la sonda TMRE, la masa mitocondrial(MM) con NAO, la viabilidad celular con FDA y PI, las especies reactivas deloxígeno (ROS) con hidroetidina, y el daño lisosomal con naranja de acridina yrojo neutro. Analizamos el efecto de vincristina (VCR) (inhibidor demitofagia/autofagia), Mdivi1 (inhibidor específico de mitofagia que previene lafisión mitocondrial), ácido valproico (VPA) (inductor de biogénesismitocondrial) y doxiciclina (antibiótico que perturba la biogénesismitocondrial)Resultados CCCP causócolapso parcial del MMP a bajas dosis (5 μM) y colapso completo a dosis mayores(10-50 μM). Este efecto inmediato se mantuvo al menos durante la hora posteriora la exposición, sin modificación de la viabilidad en ninguna de las dosisevaluadas. El volumen lisosomal aumentó con dosis bajas (5-15µM), observándose desestabilizacióny ruptura lisosomal con dosis más altas (20-50 μM). El citoplasma se acidificófuertemente en las dosis más altas de CCCP y se observó además un aumento deROS intracelular. Mitocondrias y lisosomas colocalizaron sólo a dosis bajas deCCCP (5-15 μM), indicando que a dosis altas la desestabilización y rupturalisosomal impedirían que se complete la mitofagia en su fase final. Laviabilidad de las células a las 72h fue alta en el rango de dosis inferiores deCCCP (5-15 μM) con restitución total de MM y parcial de MMP. El bloqueo de la mitofagiacon VCR 1 μM o Mdivi1 50 μM disminuyó la tolerancia a CCCP, aumentando lamortalidad de las CLB. Lo mismo se observó al perturbar la biogénesis mitocondrialcon doxiciclina 10 µM. El tratamiento con VPA 1 mM aumentó la MM pero también disminuyóla tolerancia a CCCP y aumentó la mortalidad de las CLB. Conclusiones Eltratamiento con CCCP colapsó el MMP en las CLB causando aumento intracelular deROS y un daño celular generalizado, incluyendo desestabilización y rupturalisosomal, con fuerte acidificación citoplasmática. A pesar de ello, unafracción significativa de las CLB fue capaz de sobrevivir luego de 72h, lo quesugiere que estas células de linfoma no necesitaron de las mitocondrias comofuente de energía. Sin embargo, el bloqueo de la mitofagia con VCR o Mdivi1 yla interrupción de la biogénesis con doxiciclina, disminuyeron la tolerancia aCCCP (mayor mortalidad). La tolerancia a CCCP podría ser un parámetro celularintrínseco, indicativo de resistencia a la apoptosis en CLB, que podríacorrelacionarse con la progresión de la enfermedad y resistencia al tratamientoen el linfoma de Burkitt y aun en otros linfomas, adquiriendo entonces unpotencial impacto pronóstico. La biogénesis y recambio mitocondrial podríantener un rol en la resistencia de las CLB a fármacos citotóxicos y por lo tantoofrecer nuevos blancos para las terapias combinadas.