Beneficial effects of Enterococcus faecalis CECT7121

MOLINA MAT¨ªAS ALEJANDRO; AZPITOZ MAR¨ªA BEL¨¦N; MANGHI MARCELA ALEJANDRA; CASTRO MARISA SILVIA

Facultad de Farmacia y Bioqu¨ªmica

Simposio; Simposio "The Milstein- Köhler Conference School Of Pharmacy and Biochemistry, University of Buenos; 2009

International Master Program in Biomedical Sciences

Beneficial effects of Enterococcus faecalis CECT7121 on the inmune response. Relating immunological aspects and possible mechanisms of action Molina, Mat¨ªas Alejandro; Azpiroz, Mar¨ªa Bel¨¦n; Manghi, Marcela Alejandra; Castro, Marisa Silvia. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral ¡°Prof. Ricardo A. Margni¡± (CONICET-UBA). C¨¢tedra de Inmunolog¨ªa, FFy B Se estudi¨® la capacidad moduladora del Enterococcus faecalis CECT7121 sobre el sistema inmune empleando diferentes modelos biol¨®gicos en ratones BALB/c pretratados con la bacteria: *Infeccion con Salmonella serotipo Enteritidis El pre-tratamiento ig con E. faecalis CECT7121, se observ¨® menor morbilidad y mortalidad de los animales desafiados; y disminuci¨®n en el recuento de Salmonella en intestino, bazo e h¨ªgado. La protecci¨®n conferida podr¨ªa estar mediada por un bloqueo en Placas de Peyer (sitios de ingreso de Salmonella ) y/o en los sitios de adherencia intestinal, y una menor replicaci¨®n y diseminaci¨®n del pat¨®geno. Los resultados est¨¢n en l¨ªnea con el escenario de citoquinas inflamatorias producido por los macr¨®fagos peritoneales cuando fueron activados con E. faecalis CECT7121  ** Inmunizaci¨®n con vacuna DTPw (Difteria, T¨¦tanos y Pertussis) Los animales pre-tratados ig con E. faecalis CECT7121 y luego inmunizados con la vacuna DTPw presentan mayor respuesta celular de memoria anti-TT y anti-TD (efecto adyuvante) y secretan niveles m¨¢s altos de IFN¦Ã, generando un escenario inmune con un sesgo m¨¢s pronunciado hacia Th1. Con respecto a la respuesta humoral, no hubo variaci¨®n en el  t¨ªtulo de anticuerpos espec¨ªficos totales ni en la relaci¨®n de isotipos IgG1/IgG2a. ***Desaf¨ªo con c¨¦lulas tumorales (linfoma LBC), Los animales pre-tratados ip con E. faecalis CECT7121 y luego desafiados por la misma v¨ªa con una dosis letal de linfoma (106 c¨¦l LBC/rat¨®n) presentan 77% de ¨ªndice de protecci¨®n versus el control (0%). Al re-desafiar los animales sobrevivientes (sin tratamiento adicional con E. faecalis CECT7121), el 89% resulta protegido y sobrevive. Estos animales sobrevivieron porque generaron una respuesta de memoria anti-tumoral orientada hacia un perfil Th1 con mayores niveles de IFN¦Ã, IL-12 e IL-10 que en los animales control (estudios a nivel espl¨¦nico). Un perfil de respuesta tipo Th1 es fundamental en la respuesta anti-tumoral, ya que facilita la eliminaci¨®n de las c¨¦lulas tumorales. A su vez, el aumento en la producci¨®n de IL-10 explica el estado saludable de los animales sobrevivientes al re-desaf¨ªo tumoral, al potenciar una regulaci¨®n inmunitaria del balance Th1/Th2, controlando el escenario pro-inflamatorio estimulado por la administraci¨®n de E. faecalis CECT7121. En el rechazo primario, la sobrevida de los animales es muy probable que se deba a la vigorosa respuesta inmune innata puesta en marcha por el pre-tratamiento con E. faecalis CECT7121. ****Modulaci¨®n de la Respuesta Al¨¦rgica anti-ovoalb¨²mina En los procesos  al¨¦rgicos predomina la respuesta inmune Th2 con la secreci¨®n de IL-4, IL-5 e IL-13 y producci¨®n exacerbada de IgE. Una forma de prevenir este desorden inmunol¨®gico es modular la respuesta sesg¨¢ndola hacia Th1. Nuestro grupo de trabajo analiz¨® la actividad de E. faecalis CECT7121 para modular la respuesta al¨¦rgica puesta en marcha por la inmunizaci¨®n sc con  10 ug de Ova y 1 mg de Al(OH)3, los d¨ªas 0, 7 y 21. En ratones inmunizados con Ova se analiz¨® la acci¨®n de  E. faecalis CECT7121 (3.10e8 UFC/ml, 200 ul) administrada ig los d¨ªas -3, -2, -1 y como refuerzo los d¨ªas 13, 14 y 15 (EF/Ova).  El grupo control fue tambi¨¦n inmunizado con Ova pero no fue tratado con la bacteria (SF/Ova). En el grupo Ef/Ova, tanto los niveles de IgE s¨¦rica espec¨ªfica como los de IL-4, IL-5, IL-13 e IL-10 secretados (en sobrenadante de cultivo de las c¨¦lulas espl¨¦nicas al ser estimuladas con Ova) fueron menores que en los animales control (SF/Ova). No se observ¨® diferencia significativa en los niveles de IgG1 e IgG2a anti-Ova, ni en los de IL-12.   SF/Ova Ef/Ova IgE anti-Ova (DO) 0.79 ¡À 0.11 0.44 ¡À 0.05 IgG1 anti-Ova (DO) 0.79 ¡À 0.05 0.83 ¡À 0.08 IgG2a anti-Ova (DO) 0.27 ¡À 0.03 0.25 ¡À 0.04                 IL-4 (pg/ml) 316.5 ¡À 41.4 156.3 ¡À 33.5 IL-5 (pg/ml) 270.6 ¡À 99.1 96.7 ¡À 45.5 IL-13 (pg/ml) 19.2 ¡À 6.8 1.4 ¡À 0.8 IL-10 (pg/ml) 28.9 ¡À 8.3 6.5 ¡À 2.3 IL-12 (pg/ml) 20.1 ¡À 3.4 24.6 ¡À 2.9 Nuestros resultados ponen en evidencia que el pre-tratamiento ig con E. faecalis CECT7121 disminuye el establecimiento de la respuesta al¨¦rgica anti-Ova en el modelo murino.