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La supervivencia intracelular de Brucella se debe a factores de virulencia secretados a través de un sistema de secreción tipo IV (SST4), codificado por 12 genes del operón VirB. En este trabajo evaluamos si durante la infección con Brucella se producen anticuerpos contra las proteínas VirB7 y VirB9 del SST4, haciendo posible su uso como antígenos en ensayos diagnósticos. Las proteínas fueron obtenidas en forma recombinante en E. coli fusionadas a una cola de 6-His y purificadas por columnas de Ni- NTA. Con estas proteínas se diseñaron ensayos de ELISA indirecto para la detección de anticuerpos específicos en humanos y caninos infectados. Se analizaron los sueros de 34 pacientes con brucelosis documentada. Fueron positivos para anticuerpos anti- VirB7 20 pacientes (59%) y para anti-VirB9 15 pacientes (44%). Notoriamente, 6 pacientes negativos para anti-VirB7 fueron positivos para anti-VirB9, con lo cual el total de enfermos positivos para uno o ambos ensayos fue de 26 (76%). Se analizaron también muestras seriadas de 12 perros con infección documentada, totalizando 62 sueros. Los anticuerpos anti-VirB7 fueron siempre positivos en 4 animales, fueron positivos en casi todo el seguimiento en otros 6, y siempre negativos en 2. Para anti-VirB9 los números fueron 3, 5 y 4 perros, respectivamente. También en los perros se hallaron casos positivos para anti-VirB7 y negativos para anti-VirB9 (n = 15) y viceversa (n = 4), con lo cual el total de sueros positivos para al menos uno de los ensayos fue de 47 (76%). Decidimos evaluar si un ELISA que combine ambos antígenos tiene mayor capacidad de detección que cualquiera de los ELISAs individuales. Nuestros resultados preliminares con sueros caninos indican que esto es efectivamente así. Estos resultados sugieren que las proteínas VirB pueden tener aplicación diagnóstica en brucelosis. Recientemente hemos obtenido la proteína VirB2 en forma recombinante y pensamos incorporarla a esta evaluación.