Evaluación directa del daño producido in vivo por radiación UV a células de Langerhans.

CELA ELIANA; LEONI JULIANA; GONZÁLEZ MAGLIO DANIEL.

Mar del Plata. Buenos Aires

Congreso; LVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI) y LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas (SAIC).; 2009

Sociedad Argentina de Inmunología (SAI) y Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas (SAIC).

La radiación ultravioleta (rUV) afecta directamente a las células de la epidermis, la capa exterior de la piel. Dentro de estas células se encuentran los queratinocitos, las células de Langerhans (dendríticas) y linfocitos T (en ratones LTγδ). Los estudios del daño producido por rUV fueron realizados históricamente sobre los distintos tipos celulares aislados in vitro. El objetivo fue estudiar alteraciones mitocondriales en células de epidermis (células totales y células de Langerhans) de ratones expuestos a rUV. Dos grupos (uno irradiado con 400 mJ/cm2 y otro control sin irradiar) de 6 ratones alopécicos (SKH:HR1) fueron utilizados para realizar una doble marcación con sondas fluorescentes: DiOC6 (evaluación del potencial de membrana mitocondrial) y MitoSOX (evaluación de la producción mitocondrial de O2•-, mO2•-). Posteriormente se realizó una doble marcación sobre otros dos grupos de 5 animales (uno irradiado y uno control) utilizando DiOC6 y anti-CD11c. Para las marcaciones se tomo una muestra de piel del lomo de los animales, se separó la epidermis utilizando dispasa y se obtuvo una suspensión celular por disgregación mecánica del tejido. No se observaron diferencias en la mO2•-, pero sí en la cantidad de células con mitocondrias polarizadas (funcionales) en la población total de células (p<0.01). Al realizar la segunda marcación se observó una marcada disminución en los niveles de células CD11c+ con mitocondrias polarizadas en los animales irradiados (p<0.01). Es posible determinar directamente el daño producido en las células de la epidermis mediante la utilización de sondas fluorescentes. Las células de la epidermis (tanto la población total como las CD11c+) pierden la funcionalidad mitocondrial luego de la exposición de los animales a rUV. La posibilidad de medir directamente el daño sobre células tomadas de los animales permitirá el estudio de la protección de distintos tipos celulares por tratamientos como protectores solares, antiinflamatorios, y otros.