IDEHU 05542
INSTITUTO DE ESTUDIOS DE LA INMUNIDAD HUMORAL PROF. RICARDO A. MARGNI
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Novedoso inmunoensayo multipplex por Citometría de Flujo para la detección simultánea y discriminativa de GADA e IA-2A en pacientes con Diabetes Mellitus.
Autor/es:
POSKUS, EDGARDO; ROVITTO, BRUNO D.; GUERRA, LUCIANO L.; IACONO, RUBÉN F.; POSKUS, EDGARDO; SABLIJC, ADRIANA V; ROVITTO, BRUNO D.; FACCINETTI, NATALIA I.; GUERRA, LUCIANO L.; IACONO, RUBÉN F.; SABLIJC, ADRIANA V; FACCINETTI, NATALIA I.; VALDEZ, SILVINA N.; TRABUCCHI, ALDANA; BOMBICINO, SILVINA S.; VALDEZ, SILVINA N.; TRABUCCHI, ALDANA; BOMBICINO, SILVINA S.
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; 72° Congreso Argentino de Bioquímica; 2017
Institución organizadora:
Asociación Bioquímica Argentina
Resumen:
La Diabetes Mellitus tipo 1 (DMT1) es un trastorno autoinmune con pérdida de tolerancia hacia antígenos de las células beta-pancreáticas y presenta autoanticuerpos en circulación dirigidos contra ellos. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un inmunoensayo basado en Citometría de Flujo (CF) para la determinación combinada y discriminativa de los principales marcadores de DMT1: GADA e IA-2A. Se emplearon 48 sueros de pacientes con DMT1. Para la CF, se inmovilizaron microesferas de 4 y 5 μm con cada uno de los autoantígenos recombinantes (TrxGAD y TrxIA-2ic, respectivamente). Se incubó el suero con una mezcla de ambas microesferas, y se detectaron los inmunocomplejos con una mezcla de TrxGAD-biotina/TrxIA-2ic-biotina, y luego 50,00 ng de estreptavidina-ficoeritrina. Se adquirió en un citómetro de flujo. Los resultados obtenidos fueron contrastados con el método de referencia (RBA). Se detectó GADA en un 52,1% de sueros empleando RBA (SDsmediana 3,08 y rango (-0,85)-42,26 SDs) y un 60,9% con IA-2A (SDsmediana 6,39 y rango (-2,95)-39,92 SDs), evidenciando un 77,1% de muestras con componente autoinmune y 100% de especificidad en ambos ensayos. Por CF, se detectó un 68,8% de pacientes con GADA (SDsmediana 5,66 y rango (-1,89)-124,10 SDs, sensibilidad analítica del 100% y especificidad de 98%) y un 41,7% de IA-2A (SDsmediana 0,19 y rango (-2,08)-62,07 SDs, 64,5% de sensibilidad analítica y 93,9% de especificidad). Se detectó autoinmunidad en el 77,1% de las muestras. Se logró desarrollar un inmunoensayo por CF que permitió la detección de autoinmunidad con el mismo desempeño que dos determinaciones independientes por RBA.
