IDEHU 05542
INSTITUTO DE ESTUDIOS DE LA INMUNIDAD HUMORAL PROF. RICARDO A. MARGNI
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Brucella infecta e induce una leve respuesta inflamatoria en células epiteliales intestinales humanas
Autor/es:
FERRERO MC,; RUMBO M,; FOSSATI, CA; BALDI PC,
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y LIV Reunión Científica de la SAIC; 2009
Institución organizadora:
SAI SAIC
Resumen:
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570 (153) BRUCELLA INFECTA E INDUCE UNA LEVE RESPUESTA
INFLAMATORIA EN CÉLULAS EPITELIALES INTESTINALES
HUMANAS. Ferrero M.1; Rumbo M.2; Fossati
C.3; Baldi P.4
Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral. Facultad de
Farmacia y Bioquímica. UBA1 ; Laboratorio de Investigaciones
del Sistema Inmune. Facultad de Ciencias Exactas,
UNLP.2 ; Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral.
Facultad de Farmacia y Bioquímica. UBA; Laboratorio de
Investigaciones del Sistema Inmune. Facultad de Ciencias
Exactas, UNLP.3 ; Instituto de Estudios de la Inmunidad
Humoral. Facultad de Farmacia y Bioquímica. UBA4
<ferrerom@ffyb.uba.ar>
En el hombre, una de las formas más comunes de contagio
de la brucelosis es el consumo de alimentos contaminados con
Brucella spp. Investigamos la capacidad de la cepa lisa B. abortus
2308 y las cepas rugosas B. abortus RB51 y B canis para infectar,
replicar e inducir la secreción de citoquinas en las líneas de
epitelio intestinal humano Caco-2 y HT-29. Las células se infectaron
con 200 bacterias/célula por 16 hs. A las 2, 24 y 48 hs.
posinfección (p.i.) se cuantificaron las bacterias intracelulares por
ensayos de protección con gentamicina. Todas las cepas se adhirieron
e invadieron las células Caco-2 y HT29. La adherencia
de las cepas rugosas a células HT-29 fue mayor que la de la cepa
lisa (6.5 ±0.7 x107 para B. canis y 5.7 ±0.2 x107 para RB51 vs.
5.6±0.9 x106 UFC/ml para la cepa lisa), y lo mismo ocurrió con la
invasión (7.9 ±2.6 x106 y 9.0 ±1.0 x106 vs. 2.4±0.4 x103 UFC/ml).
Los resultados fueron similares para Caco-2. La invasión dependió
de los microfilamentos y microtúbulos, ya que fue inhibida por
citocalasina D y colchicina. Sólo la cepa lisa replicó intracelularmente
en HT-29 (UFC aumentaron ~2 log a 48 hs p.i), pero su
mutante en el gen virB10 (sistema de secreción tipo IV -T4SS-)
no logró replicar. En HT-29 la infección indujo una producción
moderada de IL-8 (513.0±11.3 pg/ml para B. abortus 2308,
677.5±57.28 pg/ml para B. canis y 1243±14.8 pg/ml para RB51 a
48 hs. p.i.), una baja secreción de GM-CSF (12.61±1.17 pg/ml,
11.37±0.70 pg/ml y 15.06 ± 1.74 pg/ml, respectivamente), pero
no indujo MCP-1, IL-1â ni TNF-á. La inducción de citoquinas dependió
de la viabilidad bacteriana (B. abortus muerta por calor no
indujo citoquinas) pero no del T4SS ni de la replicación
intracelular, ya que la cepa mutada en virB10 indujo niveles de
citoquinas similares a la cepa salvaje. La infección de Caco-2 no
indujo secreción de citoquinas. Esto indica que Brucella puede
invadir y replicar en epitelio intestinal humano sin inducir una respuesta
inflamatoria importante.
