Clonado y expresión de alergenos de soja recombinantes. identificación de peptidos inmunodominantes de reactividad cruzada entre proteínas de leche bovina y soja

CURCIARELLO R,; CANDREVA ANGELA; GONZALEZ V; SMALDINI P; FOSSATI, CA; PARISI G; PETRUCCELLI S,; DOCENA GH,

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y LIV Reunión Científica de la SAIC; 2009

194 (603) CLONADO Y EXPRESIÓN DE ALERGENOS DESOJA RECOMBINANTES. IDENTIFICACIÓN DEPEPTIDOS INMUNODOMINANTES DE REACTIVIDADCRUZADA ENTRE PROTEÍNAS DE LECHE BOVINA YSOJA. Curciarello R.1; Candreva A.2; González V.3; SmaldiniP.4; Fossati C.5; Parisi G.6; Petruccelli S.7; Docena G.8LISIN; CIDCA1 2; Unidad de Fisicoquímica, Centro de Estudiose Investigaciones(UNQ).3; LISIN4 5; Unidad deFisicoquímica, Centro de Estudios e Investigaciones (UNQ).6;CIDCA7; LISIN; CIDCA8 <curciarello@biol.unlp.edu.ar>La alergia a leche de vaca (ALV) constituye la principal alergiaalimentaria que afecta a la población pediátrica argentina yde otras regiones. Además el 40% de los pacientes presentanreacciones adversas al tratamiento sustitutivo con fórmulas quecontienen soja (S). A fin de estudiar la reactividad cruzada (RC)entre ambos sistemas y explicar la intolerancia clínica, se clonaron4 alergenos de S: A4A5B3, subunidad α de la β-conglicinina, p34y p28.Se evaluó su reactividad por diferentes métodosinmunoenzimáticos empleando antisueros policlonales y mAbespecíficos de caseínas bovinas, o sueros de individuos ALV, yen un modelo murino de ALV. Previamente se identificó unpolipéptido (á-CTD) que contendría los epitopes responsables dedicha RC. La reactividad de los posibles epitopes se evaluó porsíntesis de péptidos en fase sólida, scanning de alanina y porpéptidos recombinantes. Las proteínas recombinantes y sus contrapartidasnaturales, son reconocidas por los distintos Ac específicosde PLV, por esplenocitos y por mastocitos sensibilizadosdel modelo murino. Se determinó que los péptidos seleccionadoscontienen epitopes inmunodominantes, y se identificaron posicionesde aminoácidos críticas en cada epitope para mantener lareactividad inmunoquímica. En conclusión, confirmamos la RCinmunoquímica e identificamos 3 epitopes inmunodominantes quepodrían ser los responsables de la intolerancia clínica observadaen pacientes con ALV. En base a estos Resultados planteamosmodificar los péptidos y emplearlos para inducir tolerancia en elmodelo murino de alergia.