Detección de eritopoyetina recombinante (r-Hu-EPO).¿Puede el radioinmunoensayo sustituir la valoración biológica?. Experiencia realizada en la Cátedra de Inmunología de la Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA

IACONO RF, POSKUS E.

Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA,

Congreso; 152º Jornada Científica de la Academia Nacional de Farmacia y Bioquímica; 2008

Academia Nacional de Farmacia y Bioquímica

El desarrollo de la tecnología de ADN recombinante en la industria biotecnológica ha posibilitado la obtención con un alto rendimiento de citoquinas y de otras moléculas humanas recombinantes, para su uso terapéutico. Estos nuevos productos biológicos requieren de la implementación de ensayos de control de calidad que incluyen los bioensayos, inmunoensayos y métodos fisicoquímicos. Los bioensayos están destinados a demostrar la capacidad de la citoquina recombinante de inducir una actividad biológica medible. La misma se realiza en cultivos celulares (in vitro) o en animales (in vivo). La dificultad de reducir la alta variabilidad de la medida de la potencia biológica, condujo a proponer la utilización de inmunoensayos como métodos alternativos de valoración indirecta de la potencia biológica. Estos ensayos evalúan la capacidad de unión de anticuerpos específicos contra la citoquina en cuestión y son altamente específicos, rápidos y de simple implementación. Sin embargo, la inmunorreactividad de la citoquina frente al anticuerpo puede no ser correlacionable con la actividad biológica La Eritropoyetina humana recombinante (r-Hu-EPO) es utilizada desde 1987 en el tratamiento de pacientes con anemias debidas a insuficiencia renal crónica. Es una glicoproteína de 30,4 Kda con una carga de carbohidratos del 39%, la cual es requerida para su actividad biológica in vivo pero no in vitro. El bioensayo para medir la potencia biológica se realiza midiendo la producción de reticulocitos o la incorporación de 59Fe en ratones exhipóxicos tratados con diferentes dosis de r-Hu-EPO. Por otra parte, existen tests inmunoenzimáticos (ELISA) y radiométricos (RIA) para medir EPO plasmática. El objetivo del presente trabajo fue evaluar las discordancias analíticas que manifestaron la valoración de potencia biológica por bioensayo y por valoración inmunológica (RIA), en el estudio de diferentes lotes de r-Hu-EPO liofilizadas