B. ABORTUS INDUCE ASTROGLIOSIS EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL

CLARA GARCÍA SAMARTINO; M. VICTORIA DELPINO; M. CLARA POTT GODOY; KARINA A. PASQUEVICH; PAULA BARRIONUEVO; ASTRID ZWERDLING; JULIANA CASSATARO; FERNANDO PITOSSI; GUILLERMO H. GIAMBARTOLOMEI

La Falda - Córdoba

Congreso; LVI Reunión científica anual (SAI).; 2008

B. abortus  induce ASTROGLIOSIS EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL   García Samartino C.*†, Delpino M. V. †, Pott Godoy C. ‡, Pasquevich K. A. *†, Barrionuevo P.*†, Zwerdling A.*†, Cassataro J.*†, Pitossi F.‡, Giambartolomei G. H. *†.   Depto. Inmunogenética, Hospital de Clínicas “José de San Martín,” Facultad de Medicina, UBA, Buenos Aires, Argentina *, Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (CONICET), Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA, Buenos Aires, Argentina †; Fundación Instituto Leloir, Buenos Aires, Argentina‡.     Entre las diversas formas clínicas que presenta la brucelosis la más mórbida es la neurobrucelosis. Su síntoma característico es la inflamación en el sistema nervioso central (SNC) originada por la invasión de la bacteria. Dicha respuesta inflamatoria puede llevar a la astrogliosis y microgliosis reactiva. El objetivo del trabajo fue establecer un modelo in vivo de neurobrucelosis y luego diseñar un modelo in vitro de interacción de B. abortus y sus lipoproteínas con diferentes células del SNC. Para ello, se inyectaron ratones intracranealmente con Brucella muerta por calor (HKBA) mediante estereotaxis en el cuerpo estriado. A las 24 h los animales se sacrificaron y se evaluó mediante microscopía confocal en cortes seriados de sus cerebros la inducción de astrogliosis. En los ratones inoculados con Brucella se observó el desarrollo de astrogliosis (células GFAP+) e infiltrado de neutrófilos. Habiendo establecido in vivo que Brucella era capaz de reproducir uno de los signos característicos de la neurobrucelosis, decidimos caracterizar el fenómeno in vitro. Se incubaron cultivos primarios de astrocitos y microglía con B. abortus y se evidenció que la bacteria puede infectar y replicarse dentro de ellos. Además, ambos tipos celulares secretan TNF-α, IL1-β e IL-6  cuando son infectados. Dado que resultados previos obtenidos en el laboratorio indican que las lipoproteínas de B. abortus son capaces de inducir secreción de citoquinas proinflamatorias en astrocitos y microglía, así como la apoptosis de astrocitos, decidimos investigar si además eran capaces de promover otro de los rasgos característicos de la astrogliosis: la proliferación de astrocitos. Se trataron los cultivos de astrocitos con HKBA o L-Omp19 (una lipoproteína de Brucella) y se determinó la proliferación de los mismos mediante citometría de flujo e incorporación de timidina tritiada. Tanto HKBA como L-Omp19 fueron capaces inducir la proliferación de los astrocitos. Corroborando estos resultados, la inyección de L-Omp19 en el cuerpo estriado de ratones indujo, al igual que la bacteria, astrogliosis e infiltrado neutrofílico. Estos resultados demuestran que B. abortus y sus lipoproteínas son capaces de reproducir los sígnos de la neurobrucelosis in vivo en un modelo murino, validando las conclusiones obtenidas en la caracterización del sistema in vitro.