IDEHU   05542
INSTITUTO DE ESTUDIOS DE LA INMUNIDAD HUMORAL PROF. RICARDO A. MARGNI
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Interferencia de ARN de citoquinas reguladoras de la angiogénesis en trofoblastos.
Autor/es:
DUBINSKY V,; POEHLMANN T2,; GUTIERREZ G; GENTILE T; MARKERT U
Lugar:
Facultad de Farmacia y Bioquímica UBA
Reunión:
Jornada; Simposio: Avances en Inmunología Básica y Aplicada. De la mesada a la clínica. Academia Nacional de Farmacia y Bioquímica; 2008
Institución organizadora:
Academia Nacional de FFyB
Resumen:
La invasión trofoblástica es un proceso local y temporal que regula la implantación y la llegada de oxigeno al embrión a través del diálogo con las arteriolas espiraladas endoteliales. Este hecho permitiría postular la existencia de un mecanismo regulador involucrado en la finalización de la proliferación del trofoblasto facilitando la migración celular hacia el tejido decidual y subsecuente invasión. Por otro lado, la finalización de la implantación regulada por citoquinas inflamatorias y el comienzo de una etapa angiogénica y anti-inflamatoria necesaria para un correcto desarrollo de la vasculatura placentaria, es esencial para una preñez normal. Hemos demostrado previamente que la IL-6 previene el aborto recurrente en la cruza murina CBA/J x DBA/2, mientras que aumenta los niveles de IL-6 placentaria y de la citoquina angiogénica VEGF. Teniendo en cuenta este resultado, postulamos que el Factor Inducible por Hipoxia-1α  (Hif-1α), un factor de transcripción para IL-6 y VEGF, podría estar implicado en la regulación de la expresión de IL-6 y VEGF en la interfase materno-fetal. Considerando estos datos decidimos estudiar el efecto de la interferencia de RNA de IL-6, VEGF y Hif-1α en la funcionalidad del trofoblasto in vitro. Para este propósito transfectamos células Jeg-3 con siRNA para VEGF, Hif-1α, IL-6 y sus receptores (CD126 y CD130). Como control se utilizó una secuencia no genómica de RNA de interferencia. Se realizaron ensayos de proliferación, migración e invasión utilizando insertos y matrigel, los resultados fueron medidos por citometría de flujo. El efecto de interferencia de las citoquinas se determinó mediante ELISA y Western-blot para Hif-1α. Los resultados obtenidos muestran que la invasión estaría  controlada por IL-6 y Hif-1α ya que Jeg-3 transfectadas con siRNA para IL-6 y Hif-1α presentan una disminución significativa  (p=0.02 y 0.002 respectivamente) pero no con siRNA para VEGF (p=0.14). Más aun,  encontramos que tanto IL-6 como VEGF y Hif-1α son moléculas intervinientes en la regulación de la migración trofoblástica, obteniéndose una disminución significativa en la misma cuando se interfirió el RNA para IL-6, VEGF y Hif-1α (p=0.029, 0.0072 y 0.031 respectivamente).     Teniendo en cuenta estos resultados preliminares, podemos inferir que el efecto protector de las moléculas antes mencionadas,  podría ser alcanzado mediante la regulación de la invasión del embrión que permitiría modular el desarrollo de la circulación materno-fetal.