IDEHU   05542
INSTITUTO DE ESTUDIOS DE LA INMUNIDAD HUMORAL PROF. RICARDO A. MARGNI
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Expresión en la línea celular CHO del autoantígeno proinsulina involucrado en la Diabetes Mellitus Autoinmune
Autor/es:
TRABUCCHI, ALDANA; IACONO, RUBEN F.; POSKUS, EDGARDO; VALDEZ, SILVINA N.
Lugar:
Córdoba, Argentina
Reunión:
Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y XI Jornada Científica del Grupo Rioplatense de Citometría de Flujo; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Inmunología
Resumen:
EXPRESION EN LA LINEA CELULAR CHO DE LOS PRINCIPALES AUTOANTIGE
<!--
@page { size: 21cm 29.7cm; margin: 2cm }
P { margin-bottom: 0cm; color: #000000 }
P.western { so-language: en-US }
-->
Expresión
en la línea celular CHO del autoantígeno proinsulina
involucrado en la Diabetes Mellitus Autoinmune.
Trabucchi,
A.; Iacono, R. F.; Poskus, E.; Valdez, S. N.
Cátedra
de Inmunología, Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA.
Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (IDEHU,CONICET-UBA). R.
Argentina
Uno
de los principales autoantígenos involucrados en la Diabetes
Mellitus (DM) Autoinmune es la insulina y su precursor, la
proinsulina. Algunos
trabajos internacionales indican que durante la historia natural de
la diabetes infanto-juvenil, los autoanticuerpos
anti-insulina/proinsulina (IAA/PAA) son frecuentemente los marcadores
más precoces detectados en grupos de riesgo.
El
objetivo del presente trabajo fue estudiar la respuesta inmune
humoral IAA/PAA en la DM autoinmune
mediante la hiperexpresión de proinsulina (PI), en líneas
celulares de mamífero transfectadas.
La
línea celular CHOK1 fue transfectada con el ADN codificante
para la PI, (construcción pCI-neo-PI). La transfección
y selección de los clones celulares que expresaron PI se llevó
a cabo por western blotting (WB) e inmunofluorescencia
indirecta (IFI) empleando sueros policlonales de conejo con
inmunorreactividad específica hacia PI.
El
análisis por WB de las células CHO transfectadas
(CHO-PI) reveló una banda de 9 kDa indicando la presencia de
PI. Por otro lado, la IFI evidenció una inmunorreactividad
específica perinuclear hacia la PI .
Estos
resultados preliminares indican que la PI humana recombinante
expresada en el contexto celular eucariota es reconocida por los
anticuerpos específicos. El sistema desarrollado
permitirá estudiar la inmunorreactividad de sueros de
pacientes frente al antígeno expresado en un contexto similar
al de las células beta pancreáticas. Asimismo,
posibilitará complementar el estudio comparativo de marcadores
en la DM tipo 1 autoinmune (DM tipo 1A) versus
la DM idiopática (DM tipo 1B), utilizando como referencia el
autoantígeno PI hiperexpresado en células eucariotas
transfectadas.