IDEHU   05542
INSTITUTO DE ESTUDIOS DE LA INMUNIDAD HUMORAL PROF. RICARDO A. MARGNI
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Expresión en la línea celular CHO del autoantígeno proinsulina involucrado en la Diabetes Mellitus Autoinmune
Autor/es:
TRABUCCHI, ALDANA; IACONO, RUBEN F.; POSKUS, EDGARDO; VALDEZ, SILVINA N.
Lugar:
Córdoba, Argentina
Reunión:
Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y XI Jornada Científica del Grupo Rioplatense de Citometría de Flujo; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Inmunología
Resumen:
EXPRESION EN LA LINEA CELULAR CHO DE LOS PRINCIPALES AUTOANTIGE <!-- @page { size: 21cm 29.7cm; margin: 2cm } P { margin-bottom: 0cm; color: #000000 } P.western { so-language: en-US } --> Expresión en la línea celular CHO del autoantígeno proinsulina involucrado en la Diabetes Mellitus Autoinmune. Trabucchi, A.; Iacono, R. F.; Poskus, E.; Valdez, S. N. Cátedra de Inmunología, Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (IDEHU,CONICET-UBA). R. Argentina Uno de los principales autoantígenos involucrados en la Diabetes Mellitus (DM) Autoinmune es la insulina y su precursor, la proinsulina. Algunos trabajos internacionales indican que durante la historia natural de la diabetes infanto-juvenil, los autoanticuerpos anti-insulina/proinsulina (IAA/PAA) son frecuentemente los marcadores más precoces detectados en grupos de riesgo. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la respuesta inmune humoral IAA/PAA en la DM autoinmune mediante la hiperexpresión de proinsulina (PI), en líneas celulares de mamífero transfectadas. La línea celular CHOK1 fue transfectada con el ADN codificante para la PI, (construcción pCI-neo-PI). La transfección y selección de los clones celulares que expresaron PI se llevó a cabo por western blotting (WB) e inmunofluorescencia indirecta (IFI) empleando sueros policlonales de conejo con inmunorreactividad específica hacia PI. El análisis por WB de las células CHO transfectadas (CHO-PI) reveló una banda de 9 kDa indicando la presencia de PI. Por otro lado, la IFI evidenció una inmunorreactividad específica perinuclear hacia la PI . Estos resultados preliminares indican que la PI humana recombinante expresada en el contexto celular eucariota es reconocida por los anticuerpos específicos. El sistema desarrollado permitirá estudiar la inmunorreactividad de sueros de pacientes frente al antígeno expresado en un contexto similar al de las células beta pancreáticas. Asimismo, posibilitará complementar el estudio comparativo de marcadores en la DM tipo 1 autoinmune (DM tipo 1A) versus la DM idiopática (DM tipo 1B), utilizando como referencia el autoantígeno PI hiperexpresado en células eucariotas transfectadas.