Cruzipaína en el tratamiento Inmuno-terapéutico contra la Enfermedad de Chagas

CERNY N, CAZORLA SI, GONZALEZ COBIELLO PL, DE MARZI MC, MALCHIODI EL, FRANK FM

La Falda, Córdoba

Congreso; LVI Reunión Anual de la SAI. XI Reunión Científica del Grupo Rioplatense de Citometria de flujo; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

Las drogas disponibles para el tratamiento de la enfermedad de Chagas poseen limitada efectividad, alta toxicidad y graves efectos colaterales. El desarrollo de vacunas paliativas sería un aporte significativo en el control de la transmisión de la misma. Previamente demostramos que la inmunización con cruzipaína (Cz) en un entorno Th1, genera una respuesta preventiva frente a la infección por T. cruzi. Nos propusimos analizar la capacidad inmuno-terapéutica del gen codificante de Cz en la infección aguda por T. cruzi y adicionalmente su coadministración con el gen del GM-CSF. Ratones infectados con una dosis letal o sub-letal de tripomastigotes, fueron tratados con 2 dosis de pcDNA3.1 conteniendo la secuencia codificante de (GI) pCz, (GII) pCz+pGM-CSF, (GIII) pGM-CSF. Como controles se trataron ratones con PBS o plásmido sin inserto. Observamos una disminución de la parasitemia en el GII, frente al desafío letal durante la fase aguda de la infección (1.4±0.3x105 vs 7.6±2.6x105, p<0.05) llevándolo a una sobrevida significativamente mayor al control. La disminución en la parasitemia fue mayor aún en el modelo subletal de infección (3.7±2.1x104 vs 42.9±18.0x104, p<0.01). Esta disminución se vio reflejada en un menor daño tisular evidenciado por una disminución sérica de enzimas marcadoras de daño muscular. El GII presentó una actividad sérica 7 veces menor de CK respecto al control (p<0.01) y observamos una reducción al 50% en la actividad de LDH (GI y II) y AST en los 3 grupos (p<0.05). Por lo tanto, las 3 enzimas, se encontraron significativamente disminuidas en el GII. Al analizar los títulos de anticuerpos anti-Cz el GII presentó una relación IgG2a/IgG1 16 veces mayor que el control, indicando un fuerte predominio de una respuesta Th1 (p<0.05). Superada la fase aguda de la infección (100 dpi) observamos en el GII importantes reacciones de DTH al ser desafiados con rCz: 2.5 y F105: 12.2 veces mayores que el control (p<0.05 y p<0.01). La estimulación in vitro de esplenocitos con rCz y F105 desencadenó una fuerte respuesta proliferativa en los GI y II (p<0.05 y p<0.01). La actividad sérica de las enzimas que se mantuvieron reducidas respecto al control (CK: 25% y AST: 50%, p<0,05). Podemos concluir que el tratamiento de ratones infectados con plásmido conteniendo el gen de Cz coadministrado con el de GM-CSF es capaz de controlar la infección y más importante aún, disminuir el daño tisular característico de la enfermedad de Chagas.