IDEHU 05542
INSTITUTO DE ESTUDIOS DE LA INMUNIDAD HUMORAL PROF. RICARDO A. MARGNI
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Reconstrucción de una β lactamasa utilizando una librería de peptidos
Autor/es:
VALERIA A. RISSO; MARÍA E. PRIMO; MARIO R. ERMÁCORA
Lugar:
La Plata, Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XXXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biofísica
Resumen:
La b‑lactamasa de Bacillus licheniformis (ESBL) es un buen modelo para estudiar el código de plegamiento de proteínas de mediana complejidad (1-2). La estructura de la ESBL se conoce con detalle. ESBL es una proteína de 265 residuos y posee dos dominios. Uno de ellos está formado por una lámina b central (compuesta por cinco hebras) cubierta por tres a‑hélices (hélices N y C terminales, 1 y 11 respectivamente, y la hélice 10). El otro dominio es un arreglo globular de elementos helicoidales yuxtapuestos al otro lado de la lámina b.
Sustituimos , por separado o simultáneamente, tres a-hélices por hélices anfipàticas de una biblioteca de elementos de estructura secundaria (3) (http://www.bioinfo.rpi.edu/~bystrc/Isites/index.html). Las sustituciones no presentan semejanza con la secuencia original, sin embargo, todas las variantes fueron capaces de adquirir la topología de ESBL con actividad in vitro e in vivo. Se realizo la caracterización estructural de dichas moléculas, y se observaron pequeñas perturbaciones en la estructura terciaria.
El efecto mas relevante de los reemplazos se observo en la baja estabilidad termodinámica de estas moléculas. Estudios preliminares relevaron también alteraciones en la cinética de plegado.
Demostramos que el plegado de la proteína es altamente tolerante a la substitución interna del segmento por secuencias no homologas.
