LA APOPTOSIS DE ASTROCITOS MURINOS INDUCIDA POR B. ABORTUS INVOLUCRA SUS LIPOPROTEÍNAS Y ES MEDIADA POR TNF-α

C GARC¨ªA SAMARTINO; KA PASQUEVICH; S DIGENARO; P BARRIONUEVO; A ZWERDLING; J CASSATARO; GH GIAMBARTOLOMEI

Mar del Plata

Congreso; LV Reuni¨®n Cient¨ªfica anual de la Sociedad Argentina de Inmunolog¨ªa; 2007

La brucelosis es una zoonosis causada por bacterias del g¨¦nero Brucella. El s¨ªntoma caracter¨ªstico de la neurobrucelosis es la inflamaci¨®n en el sistema nervioso central originada por la invasi¨®n de Brucella. Dicha respuesta inflamatoria puede llevar a la astrogliosis induciendo apoptosis de los astrocitos. Resultados previos obtenidos en nuestro laboratorio indican que B. abortus es capaz de inducir la producci¨®n de citoquinas (TNF-¦Á, IL-6 e IL-1¦Â) en astrocitos y que las lipoprote¨ªnas ser¨ªan uno de los componentes responsables de estas respuestas. En este trabajo evaluamos la capacidad de B. abortus y sus componentes para inducir apoptosis en astrocitos. A partir de cerebro de ratones C57BL/6 se obtuvieron cultivos primarios de astrocitos. Estos se estimularon durante 24 h con B. abortus muerta por calor (HKBA), LPS de B. abortus (LPSb) y una lipoprote¨ªna modelo de B. abortus (Omp19), lipidada (L) y no lipidada (U). Como control se utilizaron TNF-¦Á, un lipohexap¨¦ptido sint¨¦tico (Pam3cys) y paraformaldeh¨ªdo (PFA). La apoptosis fue evaluada por citometr¨ªa de flujo y por microscop¨ªa de inmunofluorescencia mediante la t¨¦cnica de AnexinaV/IP. HKBA indujo apoptosis en forma dosis dependiente, mientas que LPSb no produjo tal efecto. Tanto Omp19L como Pam3cys indujeron apoptosis, dado que Omp19U no lo hizo, la porci¨®n lip¨ªdica ser¨ªa la responsable de la apoptosis. Tambi¨¦n determinamos el mecanismo involucrado en la apoptosis. Para ello, se obtuvieron cultivos primarios de astrocitos de ratones TNFR-/-. A diferencia de lo observado en los astrocitos de ratones C57BL/6, en las c¨¦lulas de los ratones TNFR-/- no se observ¨® apoptosis con ninguno de los tratamientos excepto con PFA. Estos resultados demuestran que B. abortus y sus lipoprote¨ªnas de son capaces de inducir apoptosis en astrocitos, que la porci¨®n lip¨ªdica de las lipoprote¨ªnas es la responsable y que el mecanismo que media dicha respuesta involucra al TNF-¦Á.