LA PROLIL OLIGOPEPTIDASA DE 80 KDA (TC80) DE TRYPANOSOMA CRUZI CONFIERE PROTECCIÓN EN UN MODELO AGUDO DE INFECCIÓN MURINA

AUGUSTO E BIVONA; ANDRES SANCHEZ ALBERTI; NATACHA CERNY; ALEJANDRO C CARDOSO LANDABURU; SILVIA I CAZORLA; EMILIO L MALCHIODI

Congreso; X Congreso de Protozoologia y Enfermedades Hereditarias; 2014

Tc80 es una proteína de secreción expresada principalmente en los estadíos de tripomastigotes y amastigotes. Esta serín proteasa degrada componentes de la matriz extracelular como fibronectina, colágeno tipo I y IV, por lo que estaría implicada en la invasión tisular del parásito. Se observó además, que su inhibición bloquea la infección de células in vitro. En base a estos antecedentes, la consideramos como un posible candidato vacunal frente a la infección por T. cruzi. Clonamos Tc80 en vectores de expresión procariota y eucariota. A partir del vector procariota se expresó Tc80 recombinante (rTc80) en células E. coli BL21 en forma soluble. Con el vector eucariota se transformó Salmonella enterica serovar Typhimurium aroA 7207, la que se utilizó como sistema delivery por vía oral, del ADN codificante de Tc80 (STc80). Inmunizamos los siguientes grupos de ratones. G1- Cuatro dosis de rTc80+CpG por vía intra muscular (rTc80 i.m.); G2-cuatro dosis por vía oral de STc80; G3- un priming de dos dosis orales de STc80 y un booster de dos dosis de rTc80+CpG por vía intramuscular (P.boost); y G4- un grupo control inmunizado con Salmonella atenuada (SaroA). La respuesta humoral desencadenada fue significativa en aquellos ratones que recibieron rTc80 i.m. Más interesante, el priming con STc80 aumenta el sesgo hacia el isotipo IgG2a, indicio de la estimulación de una respuesta del tipo Th1. Por el contrario, la respuesta celular fue significativamente mayor en los ratones inmunizados con STc80, reflejado por una mayor reacción de hipersensibilidad retardada, proliferación y secreción de IL-2 por esplenocitos frente al estímulo con rTc80. Por último, todos los grupos inmunizados presentaron una reducida parasitemia y un aumento en la sobrevida ante un desafío letal con la cepa virulenta T. cruzi RA. Cabe destacar que aquellos que recibieron al menos una dosis del ADN de Tc80 presentaron una mayor sobrevida. Estos resultados consolidan a Tc80 como un candidato vacunal.