Brucella invade e induce la producción de quemoquinas en células epiteliales respiratorias humanas

FERRERO MC,; CARLOS ALBERTO FOSSATI; BALDI PC,

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y LII Reunión científica anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

En humanos Brucella puede ingresar por mucosa respiratoria y causar infección sistémica. Investigamos la capacidad de B. abortus 2308 (cepa virulenta lisa) y B. abortus RB51 (vacunal rugosa) para infectar e inducir la secreción de quemoquinas en líneas de epitelio bronquial (Calu-6) o alveolar (H460) humano. Para ello las células fueron infectadas 16 hs. a razón de 200 bacterias/célula. A las 2, 24 y 48 hs. posinfección (p.i.) se cuantificaron las bacterias intracelulares por ensayos de protección con gentamicina y recuento de UFC. Las cepas ensayadas se adhieren e invaden las células Calu-6 y H460. En Calu-6 la adherencia de B. abortus RB51 es significativamente mayor que la de la cepa lisa (7.1 ±1.2 x10(6) vs. 7.5±1.7 x10(5) UFC/ml), y lo mismo ocurre con la invasión (6±2.3 x10(5) vs. 3.9±0.8 x10(4) UFC/ml). Sin embargo, sólo la cepa lisa logra replicarse intracelularmente (1.0 ±0.1 x10(4) y 9.2 ±1.0 x10(6) UFC/ml a 48 h. p.i. para B. abortus rugosa y lisa, respectivamente). Resultados similares se encontraron para H460. La infección aumentó la producción de IL-8 en Calu-6, detectándose a las 48 h. p.i 1756±31 pg/ml y 3027±10 pg/ml en sobrenadantes de cultivo de células infectadas con cepa lisa o rugosa versus 138±23 pg/ml en las no infectadas. La infección de H460 no induce la secreción de citoquinas, lo que concuerda con nuestros resultados previos para la infección de una línea de neumocitos tipo II humanos (A549). Sin embargo, las A549 estimuladas con medio condicionado de monocitos (THP-1) infectados con B. abortus 2308 secretan MCP-1 e IL-8 en forma dependiente de la cantidad de medio agregado (MCP-1 a las 24 hs: 5803±8.9 pg/ml dil. 1/2, 4843±77 pg/ml, dil. 1/5, 4370±28.3 pg/ml, dil. 1/10 vs 2200±5.5 pg/ml basal). Las células epiteliales bronquiales responden a la infección por Brucella secretando quemoquinas, mientras que las alveolares