Parámetros de sensibilidad, especificidad en la detección del autoanticuerpo anti-Glutamato Decarboxilasa en pacientes con Diabetes Mellitus autoinmune

TRABUCCHI A.; GUERRA L; FACCINETTI NI; PENAS STEINHARDT, ALBERTO; VALDEZ SN; POSKUS E; IACONO RF

Congreso; VIII Congreso Argentino de la Caildad en el Laboratorio Clínico?CALILAB; 2014

El laboratorio de Inmunoendocrinología (LIE) es ?Laboratorio de Referencia Nacional? para la detección de marcadores (Autoanticuerpos) de autoinmunidad en Diabetes Mellitus. Los autoanticuerpos estudiados en estos pacientes son los anti-Glutamato Decarboxilasa (GADA), antiInsulina (IAA/IA), anti Tirosina Fosfatasa (IA-2A) y el anti-Transportador de Zn (ZnT8A). Los métodos empleados en el LIE para la detección de los GADA son: 1)- método radiométrico de Union de Radioligando (RBA), considerado como método de referencia, el cual emplea un trazador 35S-GAD-65 obtenido mediante un sistema de transcripción y traducción in vitro. y 2)-método inmunoenzimático (ELISA), desarrollado in house, el cual emplea la proteína recombinante GAD-65 fusionada a Thiorredoxina (Trx-GAD), desarrollada en nuestro laboratorio y patentada en Argentina y en EEUU. Es sabido que la respuesta generada por los analitos, anticuerpos, es dependiente de dos parámetro condicionantes de la interacción primaria frente al antígeno, uno de ellos es la constante de afinidad (Kaf) y el otro es la concentración molar (Q). La termodinámica de la interacción Antígeno:Anticuerpo es dependiente del estado físico del antígeno (soluble o inmovilizado) empleado en cada uno de los diseños inmunoanalíticos (RBA y ELISA). Mientras que en el RBA la interacción del anticuerpo con el antígeno se produce en fase fluida, en el ELISA dicha interacción se produce en la fase sólida. Es imposible contar con estándares primarios de referencia para la detección de GADA, por lo cual es imprescindible someter las metodologías a programas de control de calidad internacional para establecer los parámetros de sensibilidad y especificidad. El programa de control de calidad mas importante es el DASP/IASP (Diabetes Autoantibody Standardization Program (DASP), un estudio colaborativo entre la Immunology of Diabetes Society (IDS) y la US Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Posteriormente el IASP (Islet Autoantibody Standardization Program proficiency evaluation-IASP 2013-), organizado por la Immunology of Diabetes Society reemplazó al DASP. El Objetivo del presente estudio es presentar los resultados de Sensibilidad, Especificidad obtenidos, correspondientes a los métodos RBA y ELISA para la detección del marcador GADA.