Rol del potencial de membrana y la reducción de la masa mitocondrial en el antagonismo toa+MG132 en células de linfoma de Burkitt

TOMÁS LOMBARDO; VICTORIA CAVALIERE; DANIELA PAPADEMETRIO; SUSANA COSTANTINO; ALVAREZ ELIDA; GUILLERMO BLANCO

Mar del Plata, Buenos Aires

Otro; LVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; XLV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Farmacología; 2013

El trióxido de arsénico (TOA) induce despolarización mitocondrial y un incremento del stress oxidativo. Las mitocondrias con bajo potencial de membrana (PMM) son una fuente de Especies Reactivas del Oxígeno (ROS) dañinas para la célula. La eliminación de las mitocondrias en falla  resulta en cambios de la masa mitocondrial (MM) y es reconocida como un mecanismo de resistencia a drogas antitumorales al eliminar la fuente de producción de ROS.Mediante este mecanismo, las células cancerosas pueden escapar a señales de muerte inducidas por drogas cuyo blanco de acción es la mitocondria. Nuestro grupo estudió previamente el efecto citotóxico de TOA+MG132 en la línea celular Raji (linfoma de Burkitt) y U937 (leucemia promonocítica) y demostró antagonismo y sinergismo respectivamente. El objetivo de este trabajo fue evaluar la respuesta diferencial de ambas líneas frente al tratamiento TOA+MG132 en cuanto a cambios en el PMM y la MM. Para evaluar el PMM se utilizó la sonda TMRE en ensayos de citometría de flujo. La determinación de la MM se realizó por microscopia de fluorescencia con la sonda Mitotracker-Red y posterior procesamiento digital de imágenes. Resultados: TOA+MG132 generó pérdida del PMM (20%) y aumento de la MM luego de 24hs en U937 (p<0.001), en cambio, en Raji no alteró el PMM (3%) pero si generó una reducción de la MM (p<0.001). ATO produjo despolarización mitocondrial enU937 (33%) con aumento de la MM (p<0.01) pero en Raji no alteró el PMM ni la MM (p>0.05). MG132 no generó despolarización en Raji ni en U937 (1% y 1,5% respectivamente) y redujo la MM en Raji pero no en U937 (p<0.01 y p>0.05 respectivamente). Conclusiones: El sinergismo TOA+MG132 en U937 está asociado a un aumento de la masa mitocondrial y reducción de PMM. El antagonismo observado en Raji se asocia a una disminución de la masa mitocondrial sin efecto sobre el PMM lo que podría deberse a una eliminación selectiva de las mitocondrias cuyo PMM se ve afectado por el tratamiento.