El inhibidor de histonas desacetilasa, ácido valpróico, incrementa la expresión de BNIP3 en las células RAJI pero no logra revertir la resistencia a la combinatoria MG132 con trióxido de arsenico

CAVALIERE, V; LOMBARDO, T; COSTANTINO, S; PAPADEMETRIO, DL; ALVAREZ, E; BLANCO, G

Congreso; LVIII Reunión científica anual de Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión científica anual de la Sociedad Argentina de Fisiología y XLV Reunión científica anual de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; 2013

BNIP3 es una proteína de la familia Bcl-2 con un rol crítico en el balance muerte/sobrevida celular y en la resistencia a drogas citotóxicas. Su silenciamiento epigenético constituye un marcador tumoral, siendo en parte responsable de fallas en la quimioterapia. Previamente observamos que la línea U937 (leucemia promonocítica) expresa BNIP3 y no así la línea Raji (linfoma de Burkitt) y demostramos que la combinatoria MG132+ATO es sinérgica en U937 y antagónica en la línea Raji. El objetivo de este trabajo fue evaluar los niveles de expresión de ARNm para BNIP3 en células U937 y Raji con y sin tratamiento con la droga epigenética ácido valproico (AVP) y determinar además su influencia sobre el antagonismo MG132+ATO en Raji. La expresión de ARNm de BNIP3 se determinó por RT-PCR semicuantitativa y la de la proteína por western blot. El efecto citotóxico por citometría de flujo y el coeficiente de interacción (CI) por el método de Chou-Talalay. El AVP incrementó los niveles de ARNm (1,5 en Raji y 1,9 en U937 vs basal) y de proteína en ambas líneas. En U937 se observó que la expresión basal de ARNm aument por tratamiento con MG132 (1,8-2,3 vs basal, para 0,5-1,5 uM) pero no en Raji. Resultados similares se obtuvieron al evaluar la expresión de la proteína. La combinatoria subcitotóxica AVP (3 mM) con MG132 (0,5-1,5 uM) moduló los niveles de ARNm en Raji de manera dosis dependiente (1,3-1,9 vs basal). Más aún, el antagonismo MG132+ATO se incrementó en presencia de AVP 3 mM (CI>1,5 vs CI>0,25, rango: EC50 a EC90) en la línea Raji. En conclusión, el AVP desilenciaría a BNIP3 en Raji permitiendo un incremento de su expresión post tratamiento con MG132 de manera dosis dependiente. Esto se asemejaría a la situación basal de U937 donde la combinatoria MG132+ATO es sinérgica. Sin embargo, MG132+ATO con AVP aumentó el antagonismo en Raji, sugiriendo que la expresión diferencial de BNIP3 no bastaría para explicar el efecto antagónico de MG132+ATO en las células Raji.