IDEHU   05542
INSTITUTO DE ESTUDIOS DE LA INMUNIDAD HUMORAL PROF. RICARDO A. MARGNI
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Efectos modulatorios de las vesículas de membrana externa de Brucella durante la infección de monocitos
Autor/es:
POLLAK, CORA; FOSSATI, CARLOS; DELPINO, MARIA VICTORIA; BALDI, PABLO CESAR
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Inmunología
Resumen:
Diversas bacterias
gram negativas liberan vesículas de membrana externa (VME) que pueden contener
factores de virulencia y modular la respuesta inmunológica a favor del
patógeno. Previamente mostramos que la preincubación con VME de Brucella inhibe
la producción de TNF-α por monocitos
humanos (THP-1) en respuesta a agonistas de TLRs, pero aumenta la expresión de ICAM-1.
Por ello decidimos evaluar si la preincubación de THP-1 con VME modifica su
adhesión a endotelio (HMEC-1). Las VME
fueron obtenidas por concentración del medio de cultivo de B. abortus. Las células THP-1 fueron preincubadas o no con VME,
luego marcadas con calceína y colocadas sobre monocapas de HMEC-1 previamente
activadas con TNF-α. Las células no adheridas fueron removidas y se midió la
fluorescencia. Las VME produjeron un aumento dosis-dependiente (p<0.001
para 10 µg/ml) en la adherencia de los monocitos.
También evaluamos si
la incubación de células THP-1 con VME antes o durante la infección con B. abortus aumenta la adhesión e
invasión de Brucella. La preincubación con VME (10 µg/ml) produjo un
aumento significativo de bacterias adheridas (9.5 veces) e internalizadas (10.8
veces) en los monocitos respecto de las células no pretratadas con VME. La coincubación,
aumentó 17.8 veces la adhesión y 11.3 veces la invasión.
Para evaluar el
efecto de las VME sobre la producción de citoquinas en la infección, las
células THP-1 fueron incubadas o no con VME
4 h antes de la infección con B. abortus
y se midieron las citoquinas en los sobrenadantes de cultivo a las 24 hs. La
preincubación con 1 o 10 µg/ml de VME disminuyó significativamente la secreción
de TNF-α (76% y 83%) y de IL-8 (13% y 68%).
Los resultados
sugieren que las VME liberadas por Brucella
ejercen efectos que promueven la adhesión e internalización de la bacteria a
monocitos, a la vez que regulan negativamente su respuesta inmune innata frente
a la infección. Esto podría favorecer la persistencia de Brucella dentro de las células hospedadoras.