Modulación de glutatión frente al incremento de anión superóxido intracelular y su rol en la resistencia al As3+ en líneas mieloides y linfoides

LOMBARDO T; CAVALIERE V; PAPADEMETRIO D; COSTANTINO S; ANAYA L; ALVAREZ E; BLANCO G

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2012

Resumen : El Arsénico 3+ (TOA) ejerce citotoxicidad mediante la generación de especies reactivas del Oxigeno (EROs), siendo el anión superóxido (O2-) una de las más relevantes. El glutatión (GSH) neutraliza las EROs actuando como antioxidante. Las líneas Raji (linfoma de Burkitt) y U937 (leucemia promonocítica) son resistentes a TOA. Previamente demostramos en ensayos de citotoxicidad a 72hs, que TOA combinado con MG-132 (inhibidor del proteasoma) presenta sinergismo en la línea U937 y revierte la resistencia, pero en Raji presenta antagonismo. Nos propusimos estudiar las variaciones de O2- y GSH intracelular inducidas por TOA y TOA+MG-132 a 6 y 24 horas, hipotetizando que el aumento del O2- y la reducción del GSH serían los determinantes del sinergismo. Para esto, evaluamos los niveles de O2- y GSH por citometría de flujo con Hidroetidina (HE) y 5-clorometil-fluoresceina (5-CMF) respectivamente. Resultados: TOA: incrementó los niveles de O2- a 6 y 24hs (p<0.05 y p<0.01 respectivamente) en ambas líneas. El GSH en U937 se redujo significativamente a las 6 hs (p<0.05) para luego aumentar a las 24hs (p<0.01). En la línea Raji se registró una disminución de GSH en ambos tiempos (p<0.01). TOA+MG-132: Solo se registró un aumento significativo de O2- en la línea U937 a 24hs de tratamiento (p<0.05) sin observarse cambios en los demás casos. En U937 se observo una disminución de GSH a las 6hs (p<0.01). En Raji los niveles de GSH se redujeron a 6 y 24 hs (p<0.01). Concluimos que un posible mecanismo de resistencia a TOA en U937 sería aumentar el GSH en respuesta al incremento de O2- inducido por TOA y que la disminución de GSH generada por combinación con MG132 en esta línea, aumentaría su sensibilidad al TOA. Asimismo, un aumento del O2- y una disminución del GSH no implican una mayor sensibilidad al TOA en cualquier tipo celular, sino que la respuesta variará según la capacidad de cada célula de modular sus niveles de GSH frente al aumento de O2-.