Los efectos de la proteína fijadora Cambios en la fosforilación de la proteina quinasa dependiente de calcio y calmodulina tipo II (CaMKII) en el proceso evolutivo hacia la insuficiencia cardíaca

LUCOTTI I; LEZCANO N; SAID M; VITTONE L.; MUNDIÑA-WEILENAMNN C

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LV Reunión de la SAIC - Reunión Anual de SAFIS - XLII Reunión Anual de SAFE; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica - Sociedad Argentina de Fisiología - AACYTAL

Estudios de nuestro y otros laboratorios han descripto que la activación de la proteína fijadora de AMPc, Epac, cursa en miocitos cardíacos, tanto con efectos inotrópicos positivos como negativos y aún con ausencia de alteraciones contráctiles. Con el objeto de aclarar esta controversia estudiamos los efectos de un activador selectivo de Epac, 8-(4-clorofenilo)-2´-O-metiladenosina-3´-5´-monofosfato cíclico (8-CPT) en miocitos aislados de rata cargados con el indicador fluorescente Fura-2-AM, a distintas concentraciones de Ca2+ extracelular ([Ca2+]o). A 0,5 mM [Ca2+]o, el agregado de 10 μM 8-CPT aumentó el transitorio Ca2+ (CaT) y el acortamiento y disminuyó los t1/2 del CaT y del acortamiento significativamente, sin modificar el Ca2+ diastólico y la longitud basal. A 1 mM [Ca2+]o 8-CPT no afectó la contractilidad ni el CaT pero aumentó el Ca2+ diastólico (de 1,195±0,012 a 1,261±0,024, n=8-12, p<0,05), efecto que se asoció con un aumento de la frecuencia de liberaciones espontáneas de Ca2+ del retículo sarcoplasmático (RS) a través de los receptores de rianodina (RyR2) (de 3,979±0,629 a 6,911±0,928, n=9), medidas en miocitos cargados con Fluo-4-AM. 8-CPT aumentó la fosforilación de Ser2815-RyR2, sitio de la CaMKII (123,70±4,21% del control, n=7) y del regulador de la captación de Ca2+ por RS, fosfolamban (PLN) en su sitio CaMKII, Thr17 (145,05±13,88% del control, n=6). En el corazón aislado y perfundido a [Ca2+]o 1 mM, el 8-CPT provocó un aumento de la presión diastólica final de 11,40±3,30 mmHg y un efecto relajante. Los resultados sugieren que los efectos de la activación de Epac, dependen del aporte de Ca2+ a la célula ([Ca2+]o) y del balance entre la retoma y liberación de Ca2+ por el RS. El aumento del Ca2+ diastólico y la ausencia de efecto inotrópico positivo a 1mM Ca2+ indicarían un predominio de la pérdida de Ca2+ desde el RS.