Implicancia del AH en la proliferación de líneas celulares leucémicas humanas. Receptores y vías de señalización involucrados

LOMPARDÍA, SILVINA; PAPADEMETRIO, DANIELA; ERNST, GLENDA; MASCARÓ, MARILINA; ALVAREZ, ELIDA; HAJOS, SILVIA

Congreso; LIX Reunión Científica Anual de SAI; 2011

El ácido hialurónico (AH), componente de la matriz extracelular, cumple numerosas funciones fisiológicas. Su principal receptor es el CD44, pero existen otros como RHAMM y Lyve-1. En tumores sólidos se ha descripto un incremento de los niveles de AH que dispara señales proliferativas a través de CD44 activando las vías de PI3K/Akt y MAPK. Poco se sabe de su acción en procesos oncohematológicos. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del AH sobre la proliferación de células leucémicas humanas, receptores involucrados y el rol de las vías de señalización PI3K/Akt y MAPK. Para ello se utilizó una línea sensible (K562) y otra resistente a vincristina (Kv562). Se evaluó la secreción de AH por ELISA, siendo (654±35)ng/ml para K562 y (588±35)ng/ml para Kv562 (p<0,001). Se analizó la capacidad de unión de AH por citometría de flujo (CF). El (38±3)% de las células K562 y el (39±3)% de las Kv562 unieron AH. La expresión de CD44 analizada por CF fue (59±14)% para K562 y (46±7)% para Kv562. La proliferación celular fue evaluada por incorporación de 3H-T a 48 y 72h. El AH incrementó 20% la proliferación en K562 y 30% en Kv562 (p<0,001) a 48h. En K562 dicho efecto fue revertido al coincubar con anticuerpo anti-CD44, con Ly294002 (inhibidor de PI3K) y con UO126 (inhibidor de MEK) (p<0,001). En Kv562 se observó reversión al coincubar con anticuerpo anti-RHAMM y con Ly294002 (p<0,001). Resultados similares se obtuvieron luego de 72h. Por western blot se encontró que AH incrementó la relación pAkt/Akt en ambas líneas celulares (p<0,01 K562 y p<0,001 Kv562). La relación pERK/ERK aumentó sólo en las células sensibles (p<0,05). Se concluye que en condiciones basales ambas líneas celulares expresan CD44, secretan y unen AH. El AH estimula la proliferación en ambas líneas a 48 y 72h. Dicho efecto en K562 es a través de CD44 y depende de la activación de Akt y ERK. Contrariamente, para Kv562 el receptor involucrado en la proliferación es RHAMM y la vía implicada es PI3K/Akt.