Caracterización inmunoquímica de los autoanticuerpos anti-ZnT8 asociados a Diabetes Mellitus Autoinmune.

FACCINETTI, NATALIA I.; GUERRA, LUCIANO L.; TRABUCCHI, ALDANA; IACONO, RUBÉN F.; POSKUS, EDGARDO; VALDEZ, SILVINA N.

Capital Federal

Congreso; 14 Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas; 2012

Caracterización inmunoquímica de los autoanticuerpos anti-ZnT8 <!-- @page { size: 21cm 29.7cm; margin: 2cm } P { margin-bottom: 0.21cm } --> Caracterización inmunoquímica de los autoanticuerpos anti-ZnT8 asociados a Diabetes Mellitus Autoinmune FACCINETTI N.I.; GUERRA L. L.; TRABUCCHI A.; IACONO R. F.; POSKUS E.; VALDEZ S. N. La Diabetes Mellitus (DM) tipo 1 se clasifica como DM autoinmune (tipo 1A) o DM idiopática (tipo 1B). El reciente descubrimiento de ZnT8 como el cuarto autoantígeno inmunodominante involucrado en la DM tipo 1A, provee un recurso adicional para el estudio de la incidencia y progresión de la enfermedad. La determinación de autoanticuerpos anti-ZnT8 (ZnT8A) junto con otros autoanticuerpos, aumenta la sensibilidad de detección de autoinmunidad en pacientes con DM tipo 1 así como en la población de riesgo (familiares en primer grado de pacientes con DM tipo 1), contribuyendo a la disminución del número de pacientes falsamente clasificados con DM idiopática o tipo 1B. Se sabe que existen dos variantes polimórficas del ZnT8 en el residuo 325 de la molécula (Arg/Trp) y no se encuentra suficientemente definido el rol de este residuo en la inmunorreactividad de los ZnT8A. El objetivo del presente trabajo fue la caracterización inmunoquímica de los ZnT8A, a través del estudio de las especificidades hacia las formas recombinantes ZnT8-Trp325, ZnT8-Arg325 y hacia los dímeros híbridos u homogéneos: ZnT8-Trp-Arg325, ZnT8-Trp-Trp325 y ZnT8-Arg-Arg325, aportando información acerca del papel de los distintos dímeros en la estructura de epitopes y en la génesis de estos autoanticuerpos in vivo. Se estudiaron 50 muestras de pacientes con reciente diagnóstico de DM tipo 1, provistas por la American Diabetes Association (ADA) para la ejecución del programa de control de calidad internacional de marcadores de autoinmunidad, Diabetes Antibody Standardization Program (DASP). Se determinaron los marcadores de autoinmunidad para diabetes: IAA/PAA, GADA, IA-2A y ZnT8A, mediante las técnicas radiométricas de referencia (RBA). En el caso de los ZnT8A se evaluó la inmunorreactividad frente al dominio antigénico C-terminal de ZnT8 (aminoácidos 268-369), empleando las siguientes construcciones genéticas: ZnT8-Trp325, ZnT8-Arg325, ZnT8-Trp-Arg325, ZnT8-Trp-Trp325 y ZnT8-Arg-Arg325. De los 50 pacientes estudiados 19 (38.0%) fueron IAA/PAA +, 39 (78.0%) GADA +, 30 (60.0%) IA-2A+ y 31 (62.0%) ZnT8A + para al menos alguna de las construcciones genéticas empleadas. De los 31 pacientes positivos para ZnT8A, 7 (22.6%) reconocieron todas las formas simples y combinadas de ZnT8. El heterodímero ZnT8-Trp-Arg325 fue la construcción con la que se detectó el mayor porcentaje de pacientes ZnT8A + (30 pacientes, 96.8%). Asimismo, 14 pacientes (45.2%) reconocieron una, dos, o las tres costrucciones diméricas (ZnT8-Trp-Arg325, ZnT8-Trp-Trp325 y/o ZnT8-Arg-Arg325) pero ninguno de los monómeros (ZnT8-Trp325 o ZnT8-Arg325). Conclusiones: Se lograron diferenciar diferentes subpoblaciones de autoanticuerpos según sus inmunorreactividades frente a variantes antigénicas C-terminal de ZnT8, alcanzando una caracterización inmunoquímica más exhaustiva de los ZnT8A. La presencia de autoanticuerpos que reconocieron únicamente a las construcciones diméricas evidencian la presencia de epitopes mejor definidos por la estructura cuaternaria de ZnT8, independientemente del aminoácido presente en el residuo 325 de la molécula. Esta nueva información significa un aporte acerca del papel de los dímeros en la estructura de epitopes y en la génesis de estos autoanticuerpos in vivo, independientemente del enfoque genético inicial basado en las variantes polimórficas.