Papel esencial del receptor TLR2 en la respuesta inmune de los macrófagos alveolares a la infección por B. abortus

FERRERO, MARIANA.; CARVALHO, NATALIA; BARRIONUEVO, PAULA; GIAMBARTOLOMEI, GUILLERMO; COSTA-OLIVEIRA,SERGIO; BALDI, PABLO

Congreso; LIX Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2011

Brucella ingresa por v¨ªa inhalatoria en humanos y animales y luego se disemina sist¨¦micamente. Los macr¨®fagos alveolares (MA) son la primera l¨ªnea de defensa contra las bacterias inhaladas. Investigamos el rol de TLR2, TLR4 y TLR9 en la activaci¨®n de MA infectados por Brucella abortus. Para ello MA obtenidos de lavados bronquioalveolares de ratones C57BL/6 wild type (WT) o knockout (-/-) para los 3 TLRs mencionados y para MAL/TIRAP fueron infectados ex vivo con B. abortus (100 bacterias/c¨¦lula), y en sus sobrenadantes de cultivo se determin¨® por ELISA la secreci¨®n de TNF-¦Á, KC e IL-6. A las 48 h posinfecci¨®n la secreci¨®n de TNF-¦Á fue significativamente menor para los ratones TLR2-/- (37¡À11 pg/ml) y MAL/TIRAP-/- (17¡À7 pg/ml) que para los WT (774¡À13 pg/ml) o los TLR4-/- (662¡À47 pg/ml) o TLR9-/- (548¡À40 pg/ml). Un fen¨®meno similar se observ¨® para KC (27¡À17 y 24¡À20 pg/ml versus 2010¡À264, 1739¡À127 y 1554¡À92 pg/ml, respectivamente). Anteriormente demostramos que B. abortus viva o muerta por calor (HKBA) o una lipoprote¨ªna de membrana externa (L-Omp19) inhiben en MA la expresi¨®n de MHC-II inducida por IFN-¦Ã. Para evaluar el papel de los TLR en este fen¨®meno los MA de ratones WT o knockout fueron estimulados con IFN-¦Ã en presencia o ausencia de HKBA o L-Omp19. Observamos que la inhibici¨®n de MHC-II era dependiente de TLR2 y MAL/TIRAP. Dicha inhibici¨®n se asoci¨® con una capacidad disminuida de presentaci¨®n antig¨¦nica, tal como se demostr¨® al enfrentar MA activados con IFN-¦Ã en presencia o ausencia de HKBA o L-Omp19 y luego incubados con ovoalb¨²mina (OVA) con un hibridoma T anti-OVA con restricci¨®n por MHC-II (IL-2 secretada por MA activados con IFN-¦Ã solo 36¡À1 pg/ml versus 11¡À1 y 16¡À1 pg/ml en los activados en presencia de HKBA o L-Omp19). TLR2 y MAL/TIRAP tienen un rol dual en la respuesta de MA a Brucella, mediando tanto la secreci¨®n de citoquinas proinflamatorias como la capacidad de la bacteria para interferir con la expresi¨®n de MHC-II y la presentaci¨®n antig¨¦nica