Papel esencial del receptor TLR2 en la respuesta inmune de los macr¨®fagos alveolares a la infecci¨®n por B. abortus.

FERRERO MC; CARVALHO NB; BARRIONUEVO P; GIAMBARTOLOMEI G; COSTA OLIVEIRA S; BALDI PC

San Miguel de Tucuman

Congreso; LIX Reunión Científica anual de la SAI.; 2011

Sociedad Argentina de Inmunologia (SAI)

Brucella ingresa por vía inhalatoria en humanos y animales y luego se disemina sisté¦micamente. Los macrófagos alveolares (MA) son la primera línea de defensa contra las bacterias inhaladas. Investigamos el rol de TLR2, TLR4 y TLR9 en la activación de MA infectados por Brucella abortus. Para ello MA obtenidos de lavados bronquioalveolares de ratones C57BL/6 wild type (WT) y de ratones knockout (-/-) para los 3 TLRs mencionados y para MAL/TIRAP fueron infectados ex vivo con B. abortus (100 bacterias/célula), y en sus sobrenadantes de cultivo se determinó por ELISA la secreción de TNF-a, KC e IL-6. A las 48 h posinfección la secreción de TNF-a fue significativamente menor para los ratones TLR2-/- (37+/-11 pg/ml) y MAL/TIRAP-/- (17+/-7 pg/ml) que para los WT (774+/-13 pg/ml) o los TLR4-/- (662+/-47 pg/ml) o TLR9-/- (548+/-40 pg/ml). Un fenómeno similar se observó para KC (27+/-17 y 24+/-20 pg/ml versus 2010+/-264, 1739+/-127 y 1554+/-92 pg/ml, respectivamente). Anteriormente demostramos que B. abortus viva o muerta por calor (HKBA) o una lipoproteína de membrana externa (L-Omp19) inhiben en MA la expresión de MHC-II inducida por IFN-g. Para evaluar el papel de los TLR en este fenómeno los MA de ratones WT o knockout fueron estimulados con IFN-g en presencia o ausencia de HKBA o L-Omp19. Observamos que la inhibición era dependiente de TLR2 y MAL/TIRAP. Dicha inhibición se asoció con una capacidad disminuida de presentación antigénica, tal como se demostró al enfrentar MA activados con IFN-g en presencia o ausencia de HKBA o L-Omp19 y luego incubados con ovoalbúmina (OVA) con un hibridoma T anti-OVA con restricción por MHC-II (IL-2 secretada por MA activados con IFN-g solo 36+/-1 pg/ml versus 11+/-1 y 16+/-1 pg/ml en los activados en presencia de HKBA o L-Omp19). TLR2 y MAL/TIRAP tienen un rol dual en la respuesta de MA a Brucella, mediando tanto la secreción de citoquinas proinflamatorias como la capacidad de la bacteria para interferir con la expresión de MHC-II y la presentación antigénica.