IDEHU   05542
INSTITUTO DE ESTUDIOS DE LA INMUNIDAD HUMORAL PROF. RICARDO A. MARGNI
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterización estructural del ectodominio del receptor IA-2beta
Autor/es:
MARTÍN E. NOGUERA; MARÍA E. PRIMO.; LAURA N. F. SOSA; EDGARDO POSKUS ; MARIO R. ERMÁCORA
Lugar:
CABA
Reunión:
Congreso; XL Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica.; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biofísica
Resumen:
IA-2beta es un proteína tirosina fosfatasa tipo receptor (PTPR) que se encuentra en los gránulos de secreción de las células beta pancreáticas y otras células de origen neuroendócrino. Es un marcador de diabetes autoinmune, y está involucrada en la secreción de insulina y en la proliferación de las células beta pancreáticas. Posee un péptido señal, un ectodominio, una región transmembrana y un dominio tirosina fosfatasa. IA-2beta comparte sus propiedades funcionales, arquitectura y localización celular con otro miembro de las PTPR llamado IA-2. Anteriormente demostramos que IA-2  posee un dominio estable en la región C-terminal de su ectodominio que forma homodímeros posiblemente involucrados en su función biológica1. En este trabajo mostramos que el segmento C terminal del ectodominio de IA-2beta también posee una región de plegado autónomo. Para este fin, se clonó y expresó en E. coli un fragmento de IA 2beta humana de la misma extensión que el estudiado para IA-2. La estructura secundaria y terciaria se estudió mediante espectros de CD en el UV lejano y cercano, y es consistente con una estructura compacta alfa+beta. Además, este segmento no une ANS, y por lo tanto no expone regiones hidrofóbicas. Experimentos de proteólisis controlada con tripsina, también indican una estructura compacta. La estabilidad termodinámica se determinó por desnaturalización térmica y química, observándose completa reversibilidad y alta cooperatividad y estabilidad. Adicionalmente, se obtuvieron cristales de este fragmento en diversas condiciones y la determinación de su estructura tridimensional está en curso. El conocimiento de las propiedades estructurales del ectodominio IA-2beta contribuirá, junto con el ya ganado para IA-2, a aclarar el rol diferencial de estas moléculas en los mecanismos de secreción celular.