BRUCELLA ABORTUS INDUCE RETENCIÓN INTRACELULAR DE LAS MOLÉCULAS DE HISTOCOMPATIBILIDAD DE CLASE I EN MACRÓFAGOS HUMANOS, DISMINUYENDO LA RESPUESTA CITOTOXICA DE LINFOCITOS T CD8+.

BARRIONUEVO, PAULA; DELPINO, VICTORIA; VELASQUEZ, LIS; CORIA, LORENA; IBAÑEZ ANDRES; MIRAGLIA, CRUZ; CASSATARO, JULIANA; GIAMBARTOLOMEI, GUILLERMO

San Miguel de tucuman

Congreso; Reunion Cientifica anual de la SAI 2011; 2011

Sociedad Argentina de inmunologia

Brucella abortus induce una respuesta Th1 con la consecuente inducci¨®n de linfocitos T (LT) citot¨®xicos (LTc), sin embargo es capaz de establecer una infecci¨®n cr¨®nica. Recientemente demostramos que B. abortus inhibe la expresi¨®n de las mol¨¦culas de histocompatibilidad de clase I (MHC-I) en superficie de macr¨®fagos humanos inducida por IFN-¦Ã, y este fen¨®meno depende de la viabilidad bacteriana. En este trabajo investigamos si la inhibici¨®n MHC-I mediada por B. abortus correlaciona con una disminuida funci¨®n citot¨®xica de los LTc. Para esto, monocitos humanos de dadores respondedores a PPD (mycobacterial purified protein derivative) fueron infectados con B. abortus y enfrentados a LT CD8+ aut¨®logos activados con PPD. La infecci¨®n con B. abortus disminuy¨® significativamente (p<0,05) la activaci¨®n de los LTc, medida como una disminuci¨®n del marcador de LT CD8+ activados, CD107a. A su vez observamos una disminuci¨®n significativa (p<0,05) de la producci¨®n de IFN-¦Ã intracitoplasm¨¢tico en los LT CD107a+. Luego investigamos el mecanismo molecular involucrado en la disminuci¨®n MHC-I en superficie. La infecci¨®n de monocitos humanos con B. abortus no modific¨® la expresi¨®n de la prote¨ªna MHC-I total respecto de las c¨¦lulas sin infectar, tal como fue medido mediante Western Blot y confirmado mediante citometr¨ªa de flujo y fluorimetr¨ªa. Dado que B. abortus no modifica la cantidad de prote¨ªna total MHC-I, pero sin embargo disminuye la expresi¨®n en superficie, nosotros hipotetizamos que B. abortus podr¨ªa estar induciendo la retenci¨®n intracelular de MHC-I. Para corroborar nuestra hip¨®tesis y usando miscroscop¨ªa confocal, demostramos que c¨¦lulas infectadas con B. abortus presentan mayor marcaci¨®n intracelular MHC-I, aunque no hay co-localizaci¨®n entre Brucella y dicha mol¨¦cula. En conjunto, estos resultados establecen que la retenci¨®n intracelular MHC-I ser¨ªa un posible mecanismo mediante el cual B. abortus puede inhibir la activaci¨®n de los LTc y evadir la vigilancia inmunol¨®gica