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Las células NK matan células tumorales o infectadas. Para identificarlas tienen receptores inhibitorios y activadores que reconocen moléculas del CMH de clase I, y a análogos no propios en células infectadas. En ratones, los receptores NK son de la familia Ly49. Ly49P y Ly49H son activantes. Ly49P reacciona con H2Dk (molécula del CMH-I), y Ly49H con el análogo de CMH-I, m157, codificado por el citomegalovirus murino (CMVM)1,2. El objetivo de este trabajo fue estudiar la cinética y termodinámica de la interacción de estas moléculas mediante resonancia plasmática de superficie empleando BIAcore. Ly49P, el mutante Ly49P D193G5, Ly49H y H2Dk , conteniendo el péptido DRSLRLPAR de MCMV, se expresaron en E. coli BL21 como cuerpos de inclusión y se replegaron in vitro rindiendo ~1 mg/litro cultivo de proteína purificada. m157 se expresó en el sistema de baculovirus. Se realizó biotinilación sitio-específica en la región N-terminal de las Ly49 para orientarlas correctamente en el chip CM5 en el que se inmovilizó avidina. La KD de la cupla Ly49P-H2Dk (0.64 ± 0.09 μM) es del mismo orden que la del mutante Ly49PD193G-H2Dk (0.47 ± 0.07μM), indicando que D193 no es un residuo clave para la interacción. No obstante, Ly49P-H2DK posee una cinética más lenta, indicando un mayor tiempo de vida media (t1/2) del complejo Ly49P-H2DK, que se debería a la formación de un puente salino entre D193 y el loop L3 de la β2microglobulina de H2DK. La interacción Ly49H-m157 se analizó a 10ºC y 25°C para determinar los parámetros termodinámicos. Se obtuvo ΔH= -4.3± 0.8 kJ/mol, ΔS=96.0 ± 4.8 J/Kmol y ΔG=-33 kJ/mol. La KD10ºC es 1.5 μM, lo que es 10 órdenes de magnitud mayor que la cupla inhibitoria Ly49I-m157 . Estos resultados indicarían que a pesar de que Ly49H reconoce a m157 con una afinidad menor que Ly49I (receptor inhibitorio), sería suficiente para activar las NK para que maten a las células infectadas por MCMV.