IQUIMEFA   05518
INSTITUTO QUIMICA Y METABOLISMO DEL FARMACO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Cultivo de callos y desarrollo de un protocolo de micropropagación de Stevia maimarensis
Autor/es:
SÜLSEN V; RODRIGUEZ TALOU J; ELSO O; PERASSOLO M
Reunión:
Simposio; XII Simposio Redbio Argentina 2021 virtual; 2021
Institución organizadora:
RedBio
Resumen:
Stevia maimarensis (Hieron.) Cabrera (Asteraceae) es una especie endémica de Argentina, presente en las provincias fitogeográficas Prepuneña y Chaqueña. A partir de esta especie se ha aislado la lactona sesquiterpénica eupatoriopicrina, activa en ensayos in vitro e in vivo contra Trypanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas. Dada la baja abundancia y localización restringida de S. maimarensis y el potencial farmacológico de eupatoriopicrina, se decidió desarrollar un protocolo de micropropagación para esta especie y buscar un medio de cultivo para el desarrollo de callos.Se establecieron cultivos in vitro iniciales a partir de aquenios desinfectados de S. maimarensis en medio Murashige-Skoog (MS), que se utilizaron para los ensayos posteriores. Para inducir el crecimiento de tallos adventicios, se cultivaron segmentos nodales en medio MS con diferentes concentraciones de 6-bencilaminopurina (BAP) (0.5-1.5 ppm). Luego de 45 días, se cuantificaron el número de tallos y de segmentos nodales desarrollados por explanto. Por otro lado, para inducir el crecimiento de raíces adventicias, se cultivaron los segmentos nodales en medio MS con diferentes concentraciones de ácido naftalenacético (NAA), ácido indolacético (IAA) y ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D). Para el desarrollo de callos, se cultivaron segmentos nodales en medio MS con diferentes combinaciones de auxinas y citoquininas. Luego de 45 días, se evaluó visualmente el crecimiento y la friabilidad de los callos obtenidos. La detección de eupatoriopicrina en extractos diclorometánicos del material vegetal se realizó mediante cromatografía en capa delgada (TLC) contra un estándar del compuesto de interés.A partir del cultivo in vitro de aquenios de S. maimarensis se desarrollaron plántulas con un solo tallo y sin desarrollo espontáneo de raíces. El medio MS adicionado con 1.0 ppm de BAP indujo el desarrollo de un mayor número de tallos (4.8) y segmentos nodales por explanto (20.8) comparado con el control (1.6 y 11.1, respectivamente). Por otra parte no se evidenció el desarrollo de raíces adventicias en ninguna de las condiciones ensayadas. Se detectó eupatoriopicrina en los extractos de tallos adventicios de S. maimarensis luego del tratamiento de los segmentos nodales con BAP. Con respecto a los cultivos de callos, los medios de cultivo con NAA 1 ppm (solo o en combinación con 0.2 ppm de kinetina o BAP) dieron origen a callos friables que crecieron abundantemente. En los extractos de estos callos no se detectó la presencia de eupatoriopicrina.Se lograron establecer cultivos in vitro de Stevia maimarensis a partir de aquenios de esta especie. Si bien se encontraron condiciones de cultivo para el desarrollo de callos friables, no se detectó la presencia de eupatoriopicrina en los mismos. Finalmente, se cumplieron con éxito las primeras etapas de un protocolo de micropropagación de S. maimarensis, al encontrarse un medio de cultivo para el desarrollo de tallos adventicios.