CAVEOLINAS CARDIACAS Y MODULACION DE LA OXIDO NITRICO SINTASA DURANTE EL ESTADO HIPOVOLÉMICO SEGÚN AVANZA LA EDAD

ARRECHE NOELIA; SARATI LORENA IVONNE; MARTINEZ, CARLA; FELLET ANDREA; BALASZCZUK AM,

Buenos Aires. Argentina

Congreso; XXXVI Congreso Argentino de Cardiología; 2010

En un trabajo previo mostramos que el estado hipovolémico inducido por una pérdida aguda de sangre se acompaña de una activación dinámica, heterogénea y dependiente del tiempo de la óxido nítrico sintetasa (NOS) cardíaca en ratas jóvenes. Las caveolinas, presentes en estructuras proteicas de membrana, las caveolas, afectarían la producción y biodisponibilidad de NO (óxido nítrico) en el corazón, según avanza la edad. Objetivos: Investigar la interacción entre la caveolina-1 y la NOS endotelial (e-NOS) en ventrículos de ratas jóvenes (J: 2 meses) y adultas (A:12 meses) sometidas a una hemorragia aguda. Materiales y métodos: grupos de animales (n = 7/grupo etario): C = control, H (sangrado: 20% de la volemia). Luego de 60 y 120 min de inducido el sangrado, en el ventrículo izquierdo de ambos grupos etarios se evaluó: actividad histoquímica de la NOS (técnica NADPH-diaforasa), niveles proteicos de la eNOS (Western blot) y coimmunoprecipitation de caveolina-1 con e-NOS inmunofluorescencia). Resultados: Actividad de la NOS: en el grupo C, no hubo diferencias significativas entre animales J y A. Luego del sangrado observamos que: en ratas J, la actividad de la NOS aumentó a los 60 y 120 min (21% y 45%, respectivamente) vs C. En A el aumento de la actividad fue 32% y 56% (ratas J: C: 0,274±0,007, H60min: 0,331±0,009*, H120min: 0,397±0,006*; ratas A: C: 0,280±0,006#, H60min: 0,369±0,006*, H120 min 0,437±0,008*; #: p=NS vs. C jóven, * p<0.001 vs C de igual grupo etario). El análisis de Western blot (anticuerpo anti e-NOS) reveló que en el grupo C, los niveles proteicos de e-NOS fueron significativamente menores (31%) en ratas A vs ratas J. En animales J la hemorragia ocasionó un aumento en los niveles de e-NOS a los 60 min (147%) en comparación con C, atenuándose este incremento a los 120 min del sangrado. En animales A, el aumento en la expresión de la e-NOS fue del 66% a los 60 min atenuándose este incremento a los 120 min. El estudio de colocalización mostró: en ratas J C: un patrón difuso de localización de e-NOS en células ventriculares asociado a caveolina-1. En animales J H, a los 60 min, se observó una disociación entre caveolina-1 y e-NOS, la cual fue parcialmente restablecida a los 120 min del sangrado. En animales A C, se observó un patrón de localización de e-NOS y caveolina-1 con una disociación mayor que en ratas J. Esta característica se observó también luego de los 60 y 120 min de realizado el sangrado. Conclusiones: La pérdida aguda de sangre induce, en las etapas más tempranas y en las más tardías, cambios en la expresión de la isoforma endotelial de la NOS en el tejido ventricular según avanza la edad. Las caveolinas-1 se asocian a la e-NOS de manera heterogénea dependiendo del tiempo de inducida la hemorragia. La edad, sería un factor que contribuye en la regulación de estas proteínas sobre el sistema del NO durante el estado hipovolémico.