Enhidrina y Fluctuanina: Lactonas sesquiterp´enicas con actividad antiparasitaria

ULLOA, JERÓNIMO; LORENZO MORALES, J. ; MUSCHIETTI, LILIANA; CASASCO, AGUSTINA; LOPEZ-ARENCIBIA, A; PETRAY, PATRICIA; URBANO, KEYNA; REDKO, FLAVIA; PIÑERO,JE; FRANK, FERNANDA

Resistencia, Chaco

Congreso; XXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoologia; 2018

Sociedad Argentina de Protozoologia.

Se estima que la enfermedad de Chagas y la leishmaniasis afecta a millones de personas en el mundo. Previamente reportamos la actividad tripanocida de productos naturales provenientes de la especie vegetal Smallanthus sonchifolius, entre ellos la lactona sesquiterpenica (STL) enhidrina. Recientemente aislamos de esta planta otra STL que identificamos como fluctuanina. Como objetivo de este trabajo nos planteamos estudiar la actividad de esta ultima sobre los agentes etimológicos de estas enfermedades y sus mecanismos de acción. Se incubaron promastigotes de Leishmania spp y epimastigotes de T. cruzi en presencia de fluctuanina (0-100µg/mL), y amastigotes de T. cruzi en presencia de 0,1-11µg/mL del compuesto y se calculo la Concentración Inhibitoria 50 y 90 (CI 50, CI 90). La citotoxicidad fue analizada en células de la linea RAW (0-100µg/mL) mediante el ensayo de MTT. Con la finalidad de evaluar los posibles mecanismos de acción de ambos compuestos, se incubaron los par´asitos con la CI 50 y se tiñeron con naranja de acridina (NA). Se evaluaron cambios en el potencial de la membrana mitocondrial mediante el uso del indicador fluorescenteJC-1 y la variación de los niveles de ATP con el uso del Celltiter-glo Luminiscent en presencia de la CI 90 de cada droga. Los valores de CI 50 para epimastigotes y promastigotes fueron 1,21 µg/ml y 4,52 µg/ml respectivamente, mientras que para amastigotes de T. cruzi fue 0,77 µg/ml. La CC 50 para la fluctuanina fue de 364,68 µg/ml, obteniéndose un índice de selectividad de 473. Con la tincion con NA, se observo que tanto la fluctuanina como la enhidrina indujeron un patrón ?de fenotipo apoptotico?caracterizado por lapresencia de cuerpos acidicos y núcleos picnoticos. También, se observo una disminución significativa del potencial de membrana mitocondrial tanto para epimastigotes como para promastigotes. Se verifico la deplecion significativa de los niveles de ATP en epimastigotes y promastigotes con ambos compuestos. En este sentido, los eventos observados de disminución del potencial de la membrana mitocondrial y deplecion en los niveles de ATP, ademas de la presencia de cuerpos acıdicos y nucleos picnoticos, sugerirían que ambas STL inducirıan muerte celular programada en los parásitos.